名称:MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 货号:M1020 规格:500T/1000T 保存:MTT 溶液-20℃保存;Formazan溶解液室温或-20℃保存。 产品内容: 500T 1000T MTT 溶液 5ml 5ml×2 Formazan 溶解液 60ml 60ml×2 产品简介: MTT 可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物formazan。在特定溶剂存在的情况下,可 以被*溶解。然后通过酶标仪可以测定490nm 波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快,则吸光度越高;细胞 毒性越大,则吸光度越低。 使?说明: 1.收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,分于96 孔板,每孔180μl,3000-10000 个细胞/孔。 2.置37℃、5%CO2 温箱培养使细胞贴壁,培养6-24 小时。 3.加入适当浓度的受试化合物,继续培养适当时间。 4.小心吸去上清,加入90μl 新鲜培养液,再加入10ul MTT 溶液,继续培养4 h。 5.然后吸掉上清,每孔加入110ul Formazan 溶解液,置摇床上低速振荡10 min,使结晶物充分溶解。在酶 联免疫检测仪490 nm 处测量各孔的吸光值。 6.同时设置调零孔(培养基、MTT、 Formazan 溶解液),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养 液、MTT、 Formazan 溶解液),每组设定3 复孔。 注意事项: 1.由于使用96 孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发的问题。一方面,由于96 孔板周 围一圈容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加PBS,水或培养液;另一方面,可以把96 孔板置于 靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。 2.MTT 溶液为黄色需避光保存,长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时,请勿使用。Formazan 溶解 液结冻或产生沉淀时可以37℃水浴孵育以促进溶解,并且必须在全部溶解并混匀后使用。 3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |