甘油三酯(TG)含量检测试剂盒 微量 产品名称: 甘油三酯(TG)含量检测试剂盒 微量产品英文名: Micro Glycerin Trilaurate(TG)Content Assay Kit产品货号:BC0625 产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼产品规格:100管/96样 产品商标:solarbio 保存与运输:4℃保存或-20℃保存; 参考价格:980 库存状态:现货 关键字: : 甘油三酯检测试剂盒|TG检测试剂盒| 甘油三酯|试剂盒
简要介绍: TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。 用异丙醇抽提取TG,KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸,过dian酸氧化甘油生成甲醛,在氯离子存在下甲醛与乙酰丙tong缩合生成黄色物质,在420 nm有特征吸收峰,其颜色的深浅与TG含量成正比。
产品详细描述 产品内容: 试剂一:自备,取玻璃空瓶,加入45mL正geng烷,80mL异丙醇,盖紧后混匀,4℃保存。 试剂二:液体3mL×1瓶,4℃保存。 试剂三:液体10mL×1瓶,4℃保存。 试剂四:液体3mL×1瓶,4℃避光保存。 试剂五:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。 试剂六:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。 标准品:液体5mL×1瓶,1mg/mL甘油三酯标准溶液,4℃保存。
产品说明: TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。 测定原理: 用异丙醇抽提取TG,KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸,过dian酸氧化甘油生成甲醛,在氯离子存在下甲醛与乙酰丙tong缩合生成黄色物质,在420 nm有特征吸收峰,其颜色的深浅与TG含量成正比。
自备仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、微量比色皿/96 孔板、水浴锅、可调式移液枪、双蒸水、125mL玻璃空瓶。
操作步骤: - TG的提取:
- 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,8000g,4℃离心10min,取上清待测。
- 细胞、细菌:先收集400-500万细胞或细菌到离心管内,弃上清,加1mL试剂一,超声波破碎1min(强度20%,超声2s,停1s),8000g, 4℃离心10min,取上清待测。
- 血清(浆)等液体样品:直接测定。
- 测定操作:
- 分光光度计预热30min,调节波长到420 nm,蒸馏水调零。
- 水浴锅预热到65℃。
| 空白管 | 标准管 | 测定管 | 双蒸水(μL) | 40 | | | 标准液(μL) | | 40 | | TG待测液(μL) | | | 40 | 试剂一(μL) | 125 | 125 | 125 | 试剂二(μL) | 25 | 25 | 25 |
加试剂一后充分混匀,再加试剂二,剧烈振荡30s,静置,待分层后取上层溶液75μL,置于新的EP管中。 3.甘油三酯含量测定: | 空白管 | 标准管 | 测定管 | 上层溶液(μL) | 15 | 15 | 15 | 试剂三 (μL) | 50 | 50 | 50 | 试剂四(μL) | 15 | 15 | 15 | 充分混匀,65℃水浴3min | 试剂五(μL) | 50 | 50 | 50 | 试剂六(μL) | 50 | 50 | 50 | 充分混匀,65℃水浴15min |
取出EP 管,待冷却后,于420nm 处比色,记为A 空,A 标和A 测。 注意:空白管和标准管只需测定一次。 1. 血清(浆)中甘油三酯含量: TG 含量(mg/dL)=C 标准品×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)×100 =100×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空) C 标准品:1mg/mL;100:1dL=100 mL。 2. 组织中甘油三酯含量: (1)按样本蛋白浓度计算 TG 含量(mg/mg prot)= C 标准品×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷Cpr =(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷ Cpr (2)按样本鲜重计算 TG 含量(mg/g鲜重)=C 标准品×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷W =(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷ W C 标准品:1mg/mL ;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g/mL 3. 细胞、细菌中甘油三酯含量: TG 含量(mg/104 cell)=C 标准品×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷细菌或细胞密度 =(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷细菌或细胞密度 C 标准品:1mg/mL;细菌或细胞密度:104 cell/mL 注意事项: - 试剂盒中有易挥发性物质,实验过程中需佩戴手套和口罩,试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。
- 加试剂二后需剧烈震荡,使待测液中甘油三酯得到充分提取。
- 低检出限为100μ mol/L。
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