产品名称: 游离脂肪酸(FFA)含量检测试剂盒产品英文名: Free Aliphatic Acid Content Assay Kit产品货号:BC0590 产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼产品规格:50管/24样 产品商标:solarbio 保存与运输:4℃保存或-20℃保存; 参考价格:400 库存状态:现货 关键字: : 游离脂肪酸检测试剂盒|FFA检测试剂盒| 游离脂肪酸|试剂盒
简要介绍: FFA既是脂肪水解的产物,又是脂肪合成的底物。血清中FFA的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关。 FFA与铜离子结合形成脂肪酸铜盐,并溶于lv仿;利用铜试剂法测定铜离子含量,即可推算出游离脂肪酸含量。
产品详细描述 产品内容: 提取液:液体50 mL×1瓶,室温保存。 试剂一:自备。实验前,取一个玻璃瓶,按照正geng烷:无水甲醇:lv仿=24:1:25的比例配置(自备),盖紧后混匀,室温保存。 试剂二:液体16 mL×1瓶,室温保存。 试剂三:粉剂×2瓶,4℃保存。临用前每瓶加入32mL无水乙醇充分溶解,4℃可保存一周。 标准品:粉剂×1支,10mg棕榈酸,室温保存。临用前把试剂转移到10 mL玻璃瓶中,加入 7.8 mLlv仿充分溶解,即为5μmol/mL的棕榈酸标准溶液。 产品说明: FFA既是脂肪水解的产物,又是脂肪合成的底物。血清中FFA的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关。 FFA与铜离子结合形成脂肪酸铜盐,并溶于lv仿;利用铜试剂法测定铜离子含量,即可推算出游离脂肪酸含量。 自备仪器和用品: 研钵、冰、台式离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、一个40mL玻璃瓶、一个10 mL玻璃瓶、正geng烷、无水甲醇、lv仿(三lv甲烷)、无水乙醇和蒸馏水。 操作步骤: 一、样品中FFA提取: 1、血清中FFA测定:将所取血液,室温静置1 h 后,于4 ℃离心机3500 rpm离心15min,取上层血清置于-20℃冰箱保存,待测。 2、组织中FFA含量测定:组织用生理盐水冲洗干净后,用吸水纸吸取表面水分,称取约0.1g,加入1.0 mL提取液,匀浆后,8000rpm,4℃离心10min,取上清液,待测。 二、测定: 1. 分光光度计预热30 min以上,调节波长到550 nm,无水乙醇调零。 2. 试剂二在37℃水浴中预热30 min以上。 3. 标准品的稀释:将标准品稀释成1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05μmol/mL。 4. 按下表在1.5mL离心管中加入相应试剂 | 对照管 | 测定管 | 空白管 | 标准管 | 蒸馏水(μL) | 50 | | | | 样本(μL) | | 50 | | | lv仿(μL) | | | 50 | | 标准品(μL) | | | | 50 | 试剂一(μL) | 500 | 试剂二(μL) | 200 | 充分振荡10min后,3000rpm,离心10min | 上层溶液(μL) | 200 | 试剂三(μL) | 800 | 充分振荡2min后,静置15min,于550 nm下测吸光值,分别记为A对照管、A测定管、A空白管、A标准管。(对照管和空白管各只做一管) |
三、FFA含量计算: 1.标准曲线的绘制: 以标准溶液的浓度为x轴,以ΔA标准(ΔA=A标准管-A空白管)为y轴,绘制标准曲线,得到方程y=kx+b。将ΔA(ΔA=A测定管-A对照管)带入方程得到x。 2.血清中FFA含量计算 FFA(μmol/L)=1000x - 组织中FFA含量计算
(1)按样本蛋白浓度计算 FFA含量(μmol/mg prot)=x÷Cpr (2)按样本鲜重计算 FFA(μmol/g鲜重)=x×V样总÷W V样总:上清液总体积,1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g。 注意事项: 1.试剂三配制应尽量晚配,可在操作到加入试剂二时,再配制试剂三。 2.必须保证每管的震荡频率及时间一致。 3.尽量在30min内完成测量,并且测完后要密封好再丢弃。 4.因所用试剂多数为有机溶剂,同一支吸头多次吸取会造成体积不准确,建议更换吸头。
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