多酚氧化酶(PPO)活性检测试剂盒 产品名称:多酚氧化酶测定试剂盒 (可见光分光光度法) 产品英文名:Polyphenol Oxidase (PPO) Assay Kit 产品货号:BC0190 产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼 产品规格:50管/24样 产品商标:solarbio 保存与运输:4℃保存或-20℃保存; 参考价格:520 库存状态:现货 关键字:多酚氧化酶测定试剂盒
简要介绍: PPO能够催化邻苯二酚产生醌,后者在525nm有特征光吸收。 PPO(EC1.10.3.1)主要存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是一种含铜的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化产生醌,从而引起褐化,与果蔬加工、茶叶品质和组培等密切相关。
产品详细描述 商品货号: | 商品品牌: | 规格 | 基本售价: | 选择规格 | BC0190-50管/24样 | Solarbio | 50管/24样 | 520.00元 | |
产品简介: PPO 主要存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是一种含铜的氧化酶,能使一元酚和二元 酚氧化产生醌,从而引起褐化,与果蔬加工、茶叶品质和组培等密切相关。 PPO 能够催化邻苯二酚产生醌,后者在 410nm 有特征光吸收。
试验中所需的仪器和试剂: 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
产品内容: 提取液:液体,60ml×1 瓶,4℃保存,用前混匀; 试剂一:液体,40ml×1 瓶,4℃保存; 试剂二:液体,10ml×1 瓶,4℃保存;
操作步骤: 一、粗酶液提取: 1. 收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每 200 万细菌或细胞加入 400μl 提取液,超 声波破碎细菌或细胞(功率 20%,超声 3 秒,间隔 10 秒,重复 30 次);8000g 4℃离心 10 分钟, 取上清,置冰上待测。 2. 称取约 0.2g 组织,加入 1ml 提取液进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10 分钟,取上清,置冰上待 测。
二、测定操作表:
试剂名称(μl) | 测定管 | 对照管 | 试剂一 | 600 | 600 | 试剂二 | 150 | 150 | 样本 | 150 | | 煮沸的样本 | | 150 | 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)中准确水浴 10min 后,迅速放入沸水中加热 10min |
冷却后,5000g,常温离心 10min,收集上清,用蒸馏水调零,410nm 处检测测定管和对照管吸光度。 注意:每个测定管需要设置一个对照管,可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液,然后集中进 行 1min 沸水浴处理
PPO活性计算: 1、组织中 PPO 活力的计算: (1)按样本蛋白浓度计算: 单位的定义:每分钟每 mg 组织蛋白在每 ml 反应体系中使 410nm 处吸光值变化 0.01 定义为一个酶活力单位。 PPO(U/mg prot)= V 反总×V 样总÷V 样÷T÷0.01×(A 测定-A 对照)÷Cpr=60×(A 测定-A 对照)÷Cpr (2)按样本鲜重计算: 单位的定义:每分钟每 g 组织蛋白在每 ml 反应体系中使 410nm 处吸光值变化 0.01 定义为一个酶活 力单位。 PPO(U/g 鲜重)= V 反总×V 样总÷V 样÷T÷0.01×(A 测定-A 对照)÷W=60×(A 测定-A 对照)÷W 2、细菌或培养细胞中 PPO 活力的计算: (1)按样本蛋白浓度计算: 单位的定义:每分钟每 mg 组织蛋白在每 ml 反应体系中使 410nm 处吸光值变化 0.01 定义为一个酶 活力单位。 PPO(U/mg prot)= V 反总×V 样总÷V 样÷T÷0.01×(A 测定-A 对照)÷Cpr=60×(A 测定-A 对照)÷Cpr (2)按细菌或细胞密度计算: 单位的定义:每分钟每 1 万个细菌或细胞在每 ml 反应体系中使 410nm 处吸光值变化 0.01 定义为一 个酶活力单位。 PPO(U/104 cell)= V 反总×V 样总÷V 样÷T÷0.01×(A 测定-A 对照)÷细菌或细胞密度(104/mL) =60× (A 测定-A 对照)÷细菌或细胞密度(104/mL) =60× (A 测定-A 对照)÷细菌或细胞密度(104/mL) V 反总:反应体系总体积,0.9mL;V 样:加入反应体系中样本体积,0.15 mL;V 样总:加入提取 液体积,1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,0.2g.
注意事项: 不同样本的多酚氧化酶的反应温度略有差别,可在 25-37℃之间进行调节。
相关文献: 《Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)》 作者:Beibei Li,Yang Ding,Xiuli Tang,Guoyi Wang,Shujuan Wu,Xianxian Li,Xiaofei Huang,Tongtong Qu,Jifeng Chen 期刊:Food and Bioprocess Technology 影响因子:3.032 PMID: 《MTA1 promotes the invasion and migration of pancreatic cancer cells potentially through the HIF-α/VEGF pathway》 作者:B Li, Y Ding, X Tang, G Wang, S Wu, X Li 期刊:Journal of Receptor and Signal Transduction Research. 影响因子:2.998 PMID:30396299 多酚氧化酶(PPO)活性检测试剂盒 |