近遇到一个问题：免疫沉淀后，抗体和Protein A/G beads 交联剂是什么？
图一：未结合抗体
图二：抗体被共价结合到蛋白A，G上
为了将抗体共价耦联到琼脂固相化的Protein A或G上，这里DSS交联剂就发挥作用了，它的特点有：
? 抗体非共价结合到蛋白 A/G Plus上
? DSS交联剂共价结合抗体和蛋白A/G Plus
? 抗体不被洗脱下来
为此，科普了一下交联剂相关的信息。
什么是交联剂？
交联剂是一类小分子化合物，分子量一般在200-600之间，具有2个或者更多的针对特殊基团（氨基、巯基等）的反应性末端，可以和2个或者更多的分子分别偶联从而使这些分子结合在一起。在生命科学研究中，巧妙地运用交联剂可以使很多工作取得突破。
目前已经被广泛地应用于：细胞膜结构研究，蛋白质结构研究，蛋白质间相互作用研究，生物daodan研究，载体蛋白与半抗原的连接，蛋白质或其他分子的固相化，抗体的标记，标记转移，蛋白质与核酸的连接。
如何选择交联剂？
交联剂的选择基于它们的化学反应性（例如：对于特定官能团的专一性）以及其他与预期应用相关的因素，包括：
? 化学特异性
? 间隔臂长度
? 水溶性和细胞膜通透性
? 相同的或不同的反应基团（同双功能与异双功能比较）
? 自发反应或光反应性基团
? 间隔臂是否可被剪切
? 包含可被放射性标记或其他方式标记的部分
活性交联剂基团与其官能团靶点
反应基团 | 官能团靶点 |
芳基叠氮化物（Aryl Azide） | 非选择性（或伯胺） |
碳化二亚胺（Carbodiimide） | 胺/羧基（-NH2/-COOH） |
zhong氮甲烷（Diazirine） | 非选择性 |
酰肼（Hydrazide） | 醛（-CHO）（氧化的碳水化合物） |
羟甲基膦（Hydroxymethyl Phosphine） | 胺（-NH2） |
亚胺酸酯（Imidoester） | 胺（-NH2） |
马来酰亚胺（Maleimide） | 巯基（-SH） |
盐乙酸酯（溴代或碘代） （Haloacetate（Bromo- or Iodo-）） | 巯基（-SH） |
N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS-ester） | 胺（-NH2） |
五氟代苯酯（PFP-ester） | 胺（-NH2） |
补骨脂素（Psoralen） | DNA和RNA |
吡啶基二硫化物（Pyridyl Disulfide） | 巯基（-SH） |
乙烯基砜（Vinyl Sulfone） | 巯基，胺，羟基 |
