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产品名称:β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)检测试剂盒

产品型号:BC0365

产品报价:

产品特点:β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)检测试剂盒
测定意义:β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆境条件下,可诱导细胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究
测定原理:β-1,3-GA水解昆布多糖,内切β-1,3-葡萄糖苷键,产生还原末端,通过测定还原糖生成速率来

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BC0365β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)检测试剂盒的详细资料:

β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)检测试剂盒

操作步骤:

一、粗酶液提取:称取约 0.2g 组织,剪碎,放入预冷的研钵中,加入 1.0 mL 提取液进行冰浴匀浆,12000g,4℃,离心 10min,取上清,置冰上待测。

二、测定步骤

1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长 540nm,蒸馏水调零。

2、样本测定,(在 1.5mL EP 管中依次加入下列试剂):试剂名称(μL) 测定管 对照管 标准管样本或标准液 35 35 35 双蒸水 35 35 试剂一 35 充分混匀,放入 37℃水浴 60 min 试剂二 230 230 230取 200μL 微量石英比色皿或 96 孔板中, 540nm 处记录各管吸光值 A,如果吸光值大于 2,可以用蒸馏水稀释后测定,ΔA=A 测定-A 对照。

β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)检测试剂盒

β-1,3-GA 活性计算:根据标准管吸光度(x)和浓度(y,mg/ml)建立标准曲线,将ΔA 带入公式中计算出样品中产生的还原糖的含量 y 值(mg/ml)(1) 按蛋白浓度计算单位的定义:每 mg 组织蛋白每小时产生 1mg 还原糖定义为一个酶活性单位。 β-1,3-GA(U/mg prot)=(y×V1)÷(V1×Cpr)=y ÷Cpr (2) 按样本鲜重计算单位的定义:每 g 组织每小时产生 1mg 还原糖定义为一个酶活性单位。 β-1,3-GA(U /g 鲜重)=(y×V1)÷(W×V1÷V2)=y ÷W (3) 按细菌或细胞密度计算单位的定义:每 1 万个细胞或细菌每小时产生 1mg 还原糖定义为一个酶活性单位。 β-1,3-GA(U /g 鲜重)=( y×V1)÷(500×V1÷V2)=0.002×y V1:加入反应体系中样本体积,0.035mL;V2:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度, mg/mL;W:样本鲜重,g。

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前每瓶加入 3.5mL 双蒸水,充分溶解待用;试剂二:液体 30mL×1 瓶,4℃保存;标准品:粉剂×1 支,4℃保存,含 10mg 无水葡萄糖(干燥失重<0.2%),临用前加入 1ml 蒸馏水溶解,配制成 10mg/ml 葡萄糖溶液备用,4℃可保存 1 周,或者用饱和苯甲酸溶液溶解,可保存更长时间。标准品准备:将标准品用蒸馏水稀释 1、0.8、0.6、0.4、0.2mg/ml。

相关文献:

《The antifungal activity of a thaumatin-like protein from oyster Crassostrea gigas》 作者:X Niu,Q Xu,W Wang,Z Yu,Z Liu,C Qu,Y Liu,C Gong,L Wang,L Song 期刊:Invertebrate Survival Journal 影响因子:0.967 PMID:

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