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产品名称:柠檬酸(CA)含量测定试剂盒 微量法

产品型号:BC2155

产品报价:

产品特点:柠檬酸(CA)含量测定试剂盒 微量法
品牌:Solarbio | 货号:BC2155
检测方法 : 微量法
规格: 100管/96样

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BC2155柠檬酸(CA)含量测定试剂盒 微量法的详细资料:

柠檬酸(CA)含量测定试剂盒 微量法

测定意义:CA是生物体内常见的有机酸,是重要的食品风味物质。此外,CA是三羧酸循环*步反应的产物。

测定原理:酸性条件下,柠檬酸还原Cr6+生成Cr3+,在545nm处有特征吸收峰;通过测定545nm吸光值的增加,即可计算出样品中柠檬酸含量。

需要的仪器,耗材:低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

 柠檬酸(CA)含量测定试剂盒 微量法

操作步骤:一、样品中柠檬酸提取: 1. 液体样品中柠檬酸提取:取 0.1mL 液体加试剂一 0.9mL,充分混匀,11000g, 4℃离心 10min,取上清液,待测。 2. 组织中柠檬酸提取:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆。11000g,4℃离心 10min,取上清置冰上待测。 3. 线粒体中柠檬酸提取:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆,600g/min,4℃离心 5min;取上清另一 EP 管中,11000g, 4℃离心 10min,弃上清(此上清液可用于细胞质 CA 含量测定);向沉淀中加试剂二 200μl,以及试剂三 2μl,充分悬浮溶解,11000g,4℃离心 10min,取上清液,待测。 4. 细菌、真菌中:按照细胞数量(10 4个):试剂一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min); 11000g,4℃离心 10min,取上清置冰上待测。二、测定操作: 1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min,调节波长到 545 nm,蒸馏水调零。 2. 试剂一置于 30℃水浴中预热 30min。 3. 空白管:取 0.5 mL EP 管,依次加入 20μL 蒸馏水,140μL 试剂一,20μL 试剂四,20μL 试剂五,混匀后室温静置 30min,于 545nm 测定吸光度,记为 A 空白管。 4. 标准管:取 0.5 mL EP 管,依次加入 20μL 标准液,140μL 试剂一,20μL 试剂四,20μL 试剂五,混匀后室温静置 30min,于 545nm 测定吸光度,记为 A 标准管。 5. 测定管:取 0.5 mL EP 管,依次加入 20μL 上清液,140μL 试剂一,20μL 试剂四,20μL 试剂五,充分混匀后室温静置 30min,于 545nm 测定吸光度,记为 A 测定管。

 相关文献:

《Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis》 作者:Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou, Shuiqing Liu, Maojia Zhao, Yilu Qin, Rui Chen, Yong Teng & Manran Liu 期刊:Cell Death and Disease 影响因子:5.959 PMID:30850587
《Cancer-Associated Fibroblasts Accelerate Malignant Progression of Non-Small Cell Lung Cancer via Connexin 43-Formed Unidirectional Gap Junctional Intercellular Communication》 作者:Luo M,Luo Y, Mao N, Huang G, Teng C,Wang H, Wu J, Liao X, Yang J 期刊:Cellular Physiology and Biochemistry 影响因子: PMID:30453281
 

 

 

 

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