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产品名称:可溶性淀粉合成酶(SSS)测定试剂盒 微量法

产品型号:BC1855

产品报价:

产品特点:可溶性淀粉合成酶(SSS)测定试剂盒 微量法
品牌:Solarbio | 货号:BC1855
检测方法 : 微量法
规格:100管/96样

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BC1855可溶性淀粉合成酶(SSS)测定试剂盒 微量法的详细资料:

        可溶性淀粉合成酶(SSS)测定试剂盒 微量法

测定意义:SSS(EC 2.4.1.21)通常以游离态存在于质体基质中,催化淀粉链延长,主要负责支链淀粉的合成。

测定原理:SSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP,在反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH,NADPH生成量与前一步反应中ADP生成量呈正比,340nm下测定NADPH增加量即可计算SSS活性。

需要的仪器,耗材:紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

可溶性淀粉合成酶(SSS)测定试剂盒 微量法

试剂一:液体×1 支,-20℃保存;临用前加入 250μL 蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂 4℃ 保存;试剂二:粉剂×1 支,-20℃保存;临用前加入 250μL 蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂 4℃ 保存;反应液Ⅰ的配制:临用前取液体一、粉剂一、粉剂二和粉剂三各一支,依次把粉剂一、粉剂二和粉剂三转移到液体一中混合溶解。反应液Ⅱ的配制:临用前取液体二、粉剂四、粉剂五、粉剂六和粉剂七各一支,依次把粉剂四、粉剂五、粉剂六和粉剂七转移到液体二中混合溶解。反应液Ⅲ的配制:临用前取液体三、粉剂八、粉剂九和粉剂十各一支,依次把粉剂八、粉剂九和粉剂十转移到液体三中混合溶解。

 

一、粗酶液制备按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。二、测定步骤 1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长 340nm,蒸馏水调零。 2、在 EP 管中按顺序加入下列试剂试剂名称(μL) 测定管样本 150 反应液Ⅰ 270 混匀,30℃保温 20 min,置沸水浴中 1 min(盖紧,防止水分散失),冰浴冷却反应液Ⅱ 150 混匀,30℃保温 30 min,置沸水浴中 1 min(盖紧,防止水分散失),冰浴冷却,10000g 25℃离心 10min,取上清液上清液 450 反应液Ⅲ 300 试剂一 10 试剂二 10 混匀后立即在 340 nm 波长下记录初始吸光度 A1 和 2min 后的吸光度 A2,计算ΔA=A2-A1。注意:反应液Ⅰ如有沉淀,加入之前要使之充分溶解混匀。

 

 

 

 

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