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产品名称:基因组提取试剂盒 DNA病毒基因组提取试剂盒

产品型号:D2400

产品报价:

产品特点:基因组提取试剂盒 DNA病毒基因组提取试剂盒
货号:D2400
规格:50T、100T
本试剂盒适合于从血清、细胞上清、淋巴液中提取 DNA 病毒基因组,不适合于 RNA 病毒基因组的提取。使用本试剂盒提取的基因组 DNA 可用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern 杂交等实验。

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D2400基因组提取试剂盒 DNA病毒基因组提取试剂盒的详细资料:


基因组提取试剂盒 DNA病毒基因组提取试剂盒
货号:D2400
规格:50T、100T
保存:室温(15℃-25℃) 干燥保存,复检期 12 个月,2℃-8℃保存时间更长 。


产品说明:
    本试剂盒适合于从血清、细胞上清、淋巴液中提取 DNA 病毒基因组,不适合于 RNA 病毒基因组的提取。使用本试剂盒提取的基因组 DNA 可用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern 杂交等实验。


产品包装:


操作步骤:
    使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
    1、 取病毒上清液 0.5ml,12000rpm 离心 5min,尽量吸尽上清使用,弃去沉淀。
    2、 向病毒上清中加入 20ul 10mg/ml 的蛋白酶 K, 充分混匀, 65℃消化 10-20min, 期间可颠倒离心管混匀数次。
    3、 向管中加入 500ul 结合液,充分混匀。再向管中加入 400ul 无水乙醇,充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀,不影响DNA 的提取,可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中,静置 2min。 (吸附柱的大容积为 750ul,可分两次加入。一次吸附完离心后再将余下的混合液体加入柱中静置离心。 )
    4、 12000rpm 离心 2min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
    5、 向吸附柱中加入 700ul 漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm 离心 1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
    6、 向吸附柱中加入 500ul 漂洗液,12000rpm 离心 1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
    7、 12000rpm 离心 2min,将吸附柱置于室温或 50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR 等。
    8、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加 50ul-100ul 经 65℃水浴预热的洗脱液,室温放置 5min,12000rpm 离心 1min。
    9、 离心所得洗脱液再加入吸附柱中, 室温放置 2min, 12000rpm 离心 2min, 即可得到高质量的病毒基因组 DNA。


注意事项:

1、试剂盒拆封后,蛋白酶K需放置-20℃保存。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3、若结合液中有沉淀,可在37℃水浴中重新溶解再使用,不影响效果。
4、洗脱缓冲液的体积好不少于50ul,体积过小会影响回收效率。洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调此范围),pH 值低于7.0会降低洗脱效率。DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。
5、DNA浓度及纯度检测:得到的基因组DNA片段的大小与病毒的保存条件和种类等因素有关。D 260 值为 1.0 相当于大约 50 ug/ml双链DNA、40 ug/ml单链DNA。OD 260 /OD 280 比值应为 1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
6、如果病毒含量过低,后提取的基因组DAN电泳可能无法检测到,但PCR等其他实验还会有结果。


 

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基因组提取试剂盒 DNA病毒基因组提取试剂盒订购说明:

1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。 
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。 
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日新价格为准。 
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运输说明:

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