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产品名称:糖代谢 β-1,3葡聚糖酶活性检测试剂盒

产品型号:BC0360

产品报价:

产品特点:糖代谢 β-1,3葡聚糖酶活性检测试剂盒
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆境条件下,可诱导细胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA 活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。

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BC0360糖代谢 β-1,3葡聚糖酶活性检测试剂盒的详细资料:

糖代谢 β-1,3葡聚糖酶活性检测试剂盒 

产品名称: β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)活性检测试剂盒

产品英文名: β-1,3-glucanase (β-1,3-GA)Assay Kit

产品货号:BC0360      产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格:50管/24         产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存;            参考价格:650
库存状态:现货                          
关键字: 葡聚糖酶检测试剂盒|β-1,3-GA检测试剂盒|葡聚糖酶|试剂盒

简要介绍:
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆境条件下,可诱导细胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA 活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。
β-1,3-GA 水解昆布多糖,内切β-1,3-葡萄糖苷键,产生还原末端,通过测定还原糖生成速率,来计算其酶活性。


产品详细描述
产品内容:
提取液:液体50mL×1 瓶,4保存;
  试剂一:粉剂×1 瓶,4保存;临用前加入3mL 蒸馏水,充分溶解待用;用不完的试剂4保存;     
试剂二:液体42mL×1 瓶,4保存;
  标准品:粉剂×1支,4℃保存,含10mg无水葡萄糖(干燥失重<0.2%),临用前加入1mL蒸馏水溶解,配制成10mg/mL葡萄糖溶液备用,4℃可保存1周,或者用饱和苯甲酸溶液溶解,可保存更长时间。
标准品准备:将标准品用蒸馏水稀释10.80.60.40.2mg/mL

产品说明
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆境条件下,可诱导细胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA 活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。
β-1,3-GA 水解昆布多糖,内切β-1,3-葡萄糖苷键,产生还原末端,通过测定还原糖生成速率,来计算其酶活性。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、粗酶液提取:
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。12000g4离心10min,取上清,置冰上待测。
    细菌或细胞:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次);12000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。
二、测定步骤:

  1. 分光光度计预热30min 以上,调节波长540nm,蒸馏水调零。
  2. 样本测定(在1.5mL EP 管中依次加入下列试剂):
试剂名称(μL测定管对照管标准管空白管
样本100100  
标准液  100 
蒸馏水 100100200
试剂一100   
充分混匀,放入37水浴60min 
试剂二600600600600

充分混匀,沸水浴5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却,540nm 处记录各管吸光值A
如果吸光值大于2,可以用提取液对样本稀释后测定(计算公式乘以相应稀释倍数),ΔA=A 测定-A对照。每个测定管需设一个对照管。
三、β-1,3-GA 活性计算:
根据标准管吸光度xA标准管-A空白管)和浓度(ymg/mL)建立标准曲线,将ΔA带入公式中计算出样品中产生的还原糖的含量y值(mg/mL

  1. 按蛋白浓度计算

单位的定义:每mg 组织蛋白每小时产生1mg 还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(U/mg prot)=(y×V1)÷(V1×Cpr)=y ÷Cpr

  1. 按样本鲜重计算

单位的定义:每g 组织每小时产生1mg 还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(U/g 鲜重)=(y×V1)÷(W×V1÷V2)=y ÷W
(3) 按细菌或细胞数量计算
单位的定义:每1万个细胞或细菌每小时产生1mg 还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(U/104 cell)=( y×V1)÷(500×V1÷V2)=0.002×y
V1:加入反应体系中样本体积,0.1mLV2:加入提取液体积,1mLCpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样本鲜重,g;500:细菌或细胞总数,万
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《The antifungal activity of a thaumatin-like protein from oyster Crassostrea gigas》 作者:X Niu,Q Xu,W Wang,Z Yu,Z Liu,C Qu,Y Liu,C Gong,L Wang,L Song 期刊:Invertebrate Survival Journal 影响因子:0.967 PMID:


糖代谢 β-1,3葡聚糖酶活性检测试剂盒 
 

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