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产品名称:基因组提取试剂盒通用基因组DNA提取试剂盒

产品型号:D2100

产品报价:

产品特点:基因组提取试剂盒通用基因组DNA提取试剂盒
货号:D2100
规格:50T、100T
本试剂盒为通用型,适合于从土壤,粪便,昆虫,以及其他样本中提取基因组 DNA。对细菌,真菌,昆虫等样本都具有很好的裂解效果,Z大限度的保留了生物 DNA 的多态性。

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D2100基因组提取试剂盒通用基因组DNA提取试剂盒的详细资料:

基因组提取试剂盒通用基因组DNA提取试剂盒
货号:D2100
规格:50T、100T
保存:室温(15℃-25℃) 干燥保存,复检期 12 个月,2℃-8℃保存时间更长。开封后请将 RNase A,蛋白酶 K于-20℃保存。


产品说明:
    本试剂盒为通用型,适合于从土壤,粪便,昆虫,以及其他样本中提取基因组 DNA。对细菌,真菌,昆虫等样本都具有很好的裂解效果,大限度的保留了生物 DNA 的多态性。使用本试剂盒提取的 DNA 产量大、完整性好,可直接用于各种常规操作,包括酶切、PCR 、文库构建、Southern 杂交等实验。


产品包装:


 

操作步骤:
    使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1、样品的处理:
    1)土壤:称取 0.1-0.3g (根据干湿)土壤,放入研钵中,倒入适量的液氮,立即研磨,重复 3 次,使土壤颗粒研成粉末,加 500ul 溶液 A,振荡*悬浮。
    2)粪便:称取 0.1-0.3g (根据干湿) 粪便,加 500ul 溶液 A,振荡*悬浮。
    3)昆虫:称取 0.1-0.3g 昆虫,倒入适量的液氮,立即研磨,重复 3 次,使昆虫研成粉末,加 500ul 溶液A,振荡*悬浮。
    4)未知样品,如为细未状,可直接称取 0.1-0.3g(根据干湿)加 500ul 溶液 A,如为块状,可 0.1-0.3g 用液氮研磨成粉未,再加 500ul 溶液 A,振荡*悬浮。2、向悬浮液中加入 20ul 10mg/ml 的 RNase A,55℃放置 10min。3、加入 20ul 10mg/ml 的蛋白酶 K,充分混匀,55℃水浴消化,30min。消化期间可颠倒离心管混匀数次,12000转离心 10min。将上清转移到一个新的离心管中。如有沉淀,可再次离心。
4、加入 500ul 溶液 B,充分混匀。如出现白色沉淀,于 55℃放置 5min,沉淀即会消失,不影响后续实验。如溶液未变清亮,说明样品消化不*,可能导致提取的 DNA 量少及不纯,还有可能导致上柱后堵柱子,请增加消化时间。
5、加入 500ul 无水乙醇,充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀,不影响 DNA 的提取,可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中,放置 2min (分两次加入,每次 700ul)。
6、12000rpm 离心 2min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
7、向吸附柱中加入 700ul 漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm 离心 1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
8、向吸附柱中加入 500ul 漂洗液,12000rpm 离心 1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中
9、12000rpm 离心 2min,将吸附柱置于室温或 50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR 等。
10、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加 50-200ul 经 65℃水浴预热的洗脱液,室温放置5min,12000rpm 离心 2min。
11、离心所得洗脱液再加入吸附柱中,室温放置 2min,12000rpm 离心 2min,即可得到高质量的基因组 DNA.。


注意事项:

1、由于样品不同,终提取的 DNA 含量和纯度也有所不同,一般来说,如果所提取 DNA 用电泳的方法检测不到,PCR 会有结果,样品尽可能的新鲜。否则会导致提取的 DNA 片段较小且提取量也下降。
2、若试剂盒中的溶液出现沉淀,可在 65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响提取效果。
3、如果样品消化不*,后面的离心步骤中可能会出现堵柱子的情况,可适当延长离心时间。
4、洗脱缓冲液的体积好不少于 50ul,体积过小会影响回收效率;洗脱液的 pH 值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液应保证其 pH 值在 8.0 左右(可用 NaOH 将水的 pH 值调此范围),pH 值低于 7.0 会降低洗脱效率;DNA 产物应保存在-20℃,以防 DNA 降解。
5、DNA浓度及纯度检测(浓度较高时):得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。 回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。 DNA应在OD 260 处有显著吸收峰, OD 260 值为 1 相当于大约 50μg/ml双链DNA、 40μg/ml单链DNA。 OD 260 /OD 280 比值应为 1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。


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基因组提取试剂盒通用基因组DNA提取试剂盒订购说明:

1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。 
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。 
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日新价格为准。 
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后,将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。


运输说明:

1、极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
2、低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
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