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当前位置:首页产品中心细胞生物学中性粒细胞分离系列P9204小鼠外周血中性粒细胞分离(Plus)试剂盒
小鼠外周血中性粒细胞分离(Plus)试剂盒

产品简介

是一种用于从小鼠外周血中分离中性粒细胞的试剂盒,其主要组成包括试剂A、试剂B、鼠红细胞沉降液、红细胞裂解液和细胞洗涤液等。 小鼠外周血中性粒细胞分离(Plus)试剂盒

产品型号:P9204
更新时间:2025-08-09
厂商性质:生产厂家
访问量:1282
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产品简介:

  同常规试剂盒相比,本试剂盒通过优化分离液相关成分,进一步提高了小鼠外周血中性粒细胞的分离纯度,更适用于流式细胞仪分选等下游实验操作。

产品组成

试剂盒组分

规格

保存条件

试剂A

200mL

2~8℃

试剂B

100mL

2~8℃

鼠红细胞沉降液

100mL

室温

红细胞裂解

100mL

室温

细胞洗涤液

200mL

室温

操作步骤(仅供参考)

1、 沉降去除红细胞取新鲜抗凝血与血液稀释液(注射用生理盐水或1XPBS)及红细胞沉降液按照1:1:1比例混匀,室温下静置30-40min后,可见红细胞沉于试管底部,小心(富含细胞及血小板)用于后续细胞分离 

2、 样本分离15mL离心管中先加入4mLA后将2mLB沿管壁缓慢叠加45°倾斜试管试剂A之上,形成梯度界面沉降后上清小心平铺于分面上方。注意分离液与样本总体积不能超过离心管的三分之二,否则会影响分离效果。)

3、 室温条件下水平转子600-1000g25-30minutes(血液体积越大所需心力越大,离心时间越长,最佳分离条件需摸索,离心最大转速不超过1000g)

4、 离心后,上层白膜层为单个核细胞层下层白膜层为粒细胞层。

5、小心吸取粒细胞层至新的离心管中,加入10mL细胞洗涤液洗涤细胞。250g,离心10min(如有红细胞污染可依据样本体积加入适量红细胞裂解液祛除污染)。

6、 弃上清加入5mL细胞清洗液重悬细胞250g离心10min

7、 弃上清重悬细胞备用。

注意事项:

A.开封前颠倒混匀,本分离液为无菌产品,为延长分离液保存时间,请在无菌条件下启封,避免微生物污染。

B.请根据实验需要预先无菌分装分离液试剂,并在其恢复至室温(18℃~25℃后使用,如室内温度较低,可将分离液预热。4℃或者是温度较低的条件下离心,可能会导致白膜层不清晰。

C.血液样本最好为新鲜抗凝血(采血2h以内),为保持中性粒细胞的活性,应避免冷冻和冷藏。

D.稀释血液或洗涤细胞,不可使用含CaMg离子的缓冲液及培养液,其成分会导致血细胞凝集,大大降低细胞得率及纯度。

E.部分塑料制品(如聚苯乙烯)因其带有的静电作用,可能会导致细胞挂壁,影响分离效果。

F.血液样本的粘稠度或者是温度差异,可能会影响分离效果,可以调节离心转数和离心时间,摸索最佳的分离条件。

G.如果要进一步对分离的细胞进行培养,注意全程保持无菌操作,避免微生物污染。


小鼠外周血中性粒细胞分离(Plus)试剂盒

小鼠外周血中性粒细胞分离(Plus)试剂盒

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