是一种用于从羊外周血中分离中性粒细胞的试剂盒,其主要组成包括试剂A、试剂C、细胞洗涤液、红细胞裂解液和全血及组织稀释液。 羊外周血中性粒细胞分离液试剂盒
产品分类
注意:本产品试剂组分和操作步骤发生变化,使用前请仔细阅读说明书。
保存:本产品对光敏感,应该室温避光储存,保质期 2 年。无菌开封后,保存于室温。
试剂盒组成:
试剂 A 200mL 室温避光
试剂 C 100mL 室温避光
红细胞裂解液 100mL 室温
细胞洗涤液 200mL 室温
操作步骤一:
红细胞沉降(仅供参考) 沉降去除红细胞:取新鲜抗凝血与血液稀释液(注射用生理盐水或 1XPBS)及红细胞沉降液按照 1:1:1 比例混匀,室温下静置 30-40min 后,可见红细胞沉于试管底部,小心吸取上清层(富含白细胞及血 小板)用于后续细胞分离。
操作步骤二:
样本分离(仅供参考)
1. 样本分离:当样本体积小于 5mL 时,先在离心管中先加入 4mL 试 剂 A,后将 2mL 试剂 C 小心叠加于试剂 A 之上,形成梯度界面(样本 体积大于等于 5mL,试剂 A 与试剂 C 比例 2:1,试剂总量等于沉降后 样本含量),将悬液小心平铺于分离液液面上方。由于密度差异,可见 明显的分层界面(注意二者的总体积不能超过离心管的三分之二,否则 会影响分离效果)。
2. 室温条件下水平转子 600-1000g ,25-30min(血液体积越大所需离心力越大,离心时间越长,最佳分离条件需摸索,离心最大转速不超过 1000g)。
3. 离心后,离心管中可见两个环状乳白色层,上层为单个核细胞层,下层即所需中性粒细胞层(受 个体差异及分离条件影响,粒细胞白膜层可能会出现颜色较浅的情况)。
4. 用吸管吸取下层中性粒细胞白膜层至新的离心管中,加入 10mL 细胞清洗液洗涤细胞,250g,离 心 10min。
5. 弃上清,加入 5mL 细胞清洗液重悬细胞,250g,离心 5min。
6. 弃上清,重悬细胞备用。
注意事项:
A.开封前颠倒混匀,本分离液为无菌产品,为延长分离液保存时间,请在无菌条件下启封,避免 微生物污染。
B.分离液使用时应始终保持室温(18℃~25℃),如室内温度较低,可将分离液预热。4℃或者是 温度较低的条件下离心,可能会导致白膜层不清晰。
C.血液样本最好为新鲜抗凝血(采血 2h 以内),为保持中性粒细胞的活性,应避免冷冻和冷藏。
D.稀释血液或洗涤细胞,不可使用含 Ca、Mg 离子的缓冲液及培养液,其成分会导致血细胞凝集, 大大降低细胞得率及纯度。
E.部分塑料制品(如聚苯乙烯)因其带有的静电作用,可能会导致细胞挂壁,影响分离效果。
F.血液样本的粘稠度或者是温度差异,可能会影响分离效果,可以调节离心转数和离心时间,摸索 最佳的分离条件。
G.如果要进一步对分离的细胞进行培养,注意全程保持无菌操作,避免微生物污染。
H.不同动物血液在不同比重分离液中的细胞离散系数及细胞带电不同,用户在制定分离液时应提 供所需分离液的比重、动物种属及被分离细胞的名称。
【本资料源自公开渠道,如需(此处)屏蔽,请联系删除】
标题:T-2 toxin triggers immunotoxic effects in goats by inducing ferroptosis and neutrophil extracellular traps
成员:Jing Huang, Kaifeng He, Xin Guo, Jiaxuan Wang, Han Hu, Xuhui Zhang, Na Guo, Yiwen Wang, Wenlong Huang, Rongsheng Huang, Tingting Liu, Xi Jiang, Deizhi Zhang, Qianyong Li, Zhengkai Wei
论文因子:3.3 发表期刊:TOXICOLOGY AND APPLIED PHARMACOLOGY pmid:39832565
【本资料源自公开渠道,如需(此处)屏蔽,请联系删除】
标题:Fusobacterium necrophorum Promotes Apoptosis and Inflammatory Cytokine Production Through the Activation of NF-κB and Death Receptor Signaling Pathways
成员:Wang Feng-Feng, Zhao Peng-Yu, He Xian-Jing, Jiang Kai, Wang Tian-Shuo, Xiao Jia-Wei, Sun Dong-Bo, Guo Dong-Hua
论文因子:6.073 发表期刊:Frontiers in Cellular and Infection Microbiology pmid:35774408
【本资料源自公开渠道,如需(此处)屏蔽,请联系删除】
标题:DNase I rescues goat sperm entrapped by neutrophil extracellular traps via the NADPH oxidase, ERK1/2, p38 signaling pathways and glycolysis
成员:Zhengkai Wei, Hongrong Hong, Wei Liu, Liqiang Jiang, Jingnan Xu, Xinxin Gao, Yuxiao Qian, Yuqian Jiang, Zha Jin, Qinqin Jin, Meiyi Chen, Zhengtao Yang
论文因子:2.9 发表期刊:DEVELOPMENTAL AND COMPARATIVE IMMUNOLOGY pmid:38036049
注意:以上文献 仅供参考
羊外周血中性粒细胞分离液试剂盒
羊外周血中性粒细胞分离液试剂盒