改良番红O-固绿软骨染色液

改良番红 O-固绿软骨染色液
G1371
5×50ml/5×100ml
6 个月有效
软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红 O 法等。
改良番红 0-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红 O 结合呈现红色，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而成绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织和骨组织区分开。番红 O 是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素）结合。番红 O 着色与阴离子的浓度近似成正比关系，间接反映了基质中蛋白多糖的含量和分布。当软骨受到损伤时，软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，从而导致番红 O 淡染或不着色。通过图像分析软件可对番红 O 染色的软骨基质进行定量分析。固绿与胶原纤维结合，不宜褪色。番红 O-固绿染色的分化很关键，分化过度易导致切片不着色，分化不足易导致切片着色过深。
自备材料：
10%福尔马林固定液，脱钙液，蒸馏水，系列乙醇。
操作步骤：
1、 标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。
2、 常规脱蜡水。
3、 入新鲜配制的 Weigert 染液染色 3-5min，水洗。
4、 酸性分化液分化 15s。
5、 蒸馏水洗 10min。
6、 在固绿染色液内浸染 5min。
7、 快速用弱酸溶液洗涤切片 10-15s，以便去除残留的固绿。
8、 入 Safranin O stain 内浸染 5min。
9、 分别用 95%乙醇、无水乙醇脱水。
10、二甲苯透明，光学树脂封固。
染色结果：
软骨基质 深红色
软骨细胞核 蓝色
细胞浆、肌肉、胶原纤维及骨组织 灰绿色
软骨细胞浆 红色
细胞核 灰黑色
注意事项：
1、 需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。
2、 Weigert 苏木素染液不可预先配制后放置，配制好后一般 24h 失去染色能力。
3、 切片在 Safranin O stain 中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。
4、 切片分化时间应恰当，以背景呈绿色为宜。
5、 Safranin O stain 染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。
6、 95%乙醇脱水时间不宜过长。
7、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关文献：

《Puerarin alters the function of monocytes/macrophages and exhibits chondroprotection in mice》 作者:Libo Peng Zikang Xie Jie Pei Bing Wang Yi Gao Yuxing Qu 期刊:Molecular Medicine Reports 影响因子:1.922 PMID:30720093
《Nano-hydroxyapatite/collagen film as a favorable substrate to maintain the phenotype and promote the growth of chondrocytes cultured in vitro》 作者:Xianfang Jiang Yanping Zhong Li Zheng Jinmin Zhao 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影响因子:2.657 PMID:29393382
 

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