过氧化氢(H2O2)含量检测试剂盒

H2O2 是生物体内常见的活性氧分子，主要由 SOD 和 XOD 等催化产生，由 CAT 和 POD 等催化降解。H2O2 不仅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互转化的枢纽。一方面，H2O2 可以直接或间接地氧化细胞内核酸，蛋白质等生物大分子，并使细胞膜遭受损害，从而加速细胞的衰老和解体；另一方面 H2O2 也是许多氧化应急反应中的关键调节因子。 H2O2 与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物，在 415nm 有特征吸收。需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、丙酮 100mL、浓盐酸 5mL、研钵和冰。

过氧化氢(H2O2)含量检测试剂盒

一、 H2O2 提取： 1. 细菌或细胞样品的制备：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10 4 个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；用试剂一定容 1mL；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 2. 组织样品的制备：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆；转移 EP 管中，用试剂一定容 1mL，8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 3. 血清（浆）样品：直接检测。

二、 测定步骤 1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长 415nm，蒸馏水调零。 2、 将试剂二、三和四 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 10min 以上。 3、在 EP 管中按顺序加入下列试剂 试剂名称（μL） 测定 对照样本 250 试剂一 250 试剂二 25 25 试剂三 50 50 4000g，25℃离心 10min，弃上清，留沉淀试剂四 250 250 加入试剂四溶解沉淀后，室温静置 5min，取 200μL 转移微量石英比色皿或 96 孔板中测定 415nm 处吸光值 A。对照管只要做一次即可。计算 ΔA＝A 测定-A 对照。

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下 1、标准条件下测定的回归曲线， y = 0.062x - 0.08 (x 为标准品浓度，μmol/ mL；y 为 ΔA)。 2、血清（浆）中 H2O2 含量的计算： H2O2 含量（μmol/mL）＝(ΔA＋0.08)÷0.062=16.13×(ΔA＋0.08) 3、细菌、细胞或动物组织中 H2O2 含量计算（1）按照蛋白浓度计算 H2O2 含量(μmol/mg prot)=[(ΔA＋0.08) ÷0.062×V1]÷(V1×Cpr)=16.13×(ΔA＋0.08) ÷Cpr 需要另外测定，建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。（2）按照样本质量计算 H2O2 含量(μmol/g 鲜重)=[(ΔA＋0.08) ÷0.062×V1]÷(W ×V1÷V2)=16.13×(ΔA＋0.08) ÷W (3 ) 按照细菌或细胞密度计算： H2O2 含量(μmol/10 )=[(ΔA＋0.08) ÷0.062×V1]÷(500×V1÷V2)=0.032×(ΔA＋0.08) V1：加入反应体系中样本体积，0.25mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500 万。 b. 用 96 孔板测定 的计算公式如下 1、标准条件下测定的回归曲线， y = 0.031x - 0.08 (x 为标准品浓度，μmol/ mL；y 为 ΔA)。 2、血清（浆）中 H2O2 含量的计算： H2O2 含量（μmol/mL）＝(ΔA＋0.08)÷0.031=32.26×(ΔA＋0.08) 3、细菌、细胞或动物组织中 H2O2 含量计算（1）按照蛋白浓度计算 H2O2 含量(μmol/mg prot)=[(ΔA＋0.08) ÷0.031×V1]÷(V1×Cpr)=32.26×(ΔA＋0.08) ÷Cpr 需要另外测定，建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。（2）按照样本质量计算 H2O2 含量(μmol/g 鲜重)=[(ΔA＋0.08) ÷0.031×V1]÷(W ×V1÷V2)=32.26×(ΔA＋0.08) ÷W (3 ) 按照细菌或细胞密度计算： H2O2 含量(μmol/10 )=[(ΔA＋0.08) ÷0.031×V1]÷(500×V1÷V2)=0.064×(ΔA＋0.08) V1：加入反应体系中样本体积，0.25mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500 万。注意：检测限为 1μmol/mL 或 1μmol/g 鲜重或 10nmol/mg prot

相关文献：

《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng,Yanyan Li,Peilin Wang,Yuan Wang,Guoqing Sun,Yongping Cai,Shou-Yi Chen,Yi Lin,Rui Zhang,Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影响因子:3.712 PMID:
《The lncRNA Plscr4 Controls Cardiac Hypertrophy by Regulating miR-214》 作者:Lifang Lv,Tianyu Li,Xuelian Li,Chaoqian Xu,Qiushuang Liu,Hua Jiang,Yingnan Li,Yingqi Liu,He Yan,Qihe Huang,Yuhong Zhou,Mingyu Zhang,Hongli Shan,Haihai Liang 期刊:Molecular Therapy Nucleic Acids 影响因子:5.919 PMID:29499950
《Physiological and transcriptomic analysis revealed the involvement of crucial factors in heat stress response of Rhododendron hainanense》 作者:Ying Zhao,Wengang Yu,Xiangyu Hu,Youhai Shi,Yu Liu,Yunfang Zhong,Peng Wang,Shuya Deng,Jun Niu,Xudong Yu 期刊:Gene 影响因子:2.638 PMID:29604462
《Heterologous Expression of Salvia miltiorrhiza MicroRNA408 Enhances Tolerance to Salt Stress in Nicotiana benthamiana》 作者: Xiaorong Guo, Junfeng Niu * and Xiaoyan Cao  期刊:International Journal of Molecular Sciences 影响因子:4.183 PMID:30544912
《Alternative splicing and translation play important roles in hypoxic germination in rice》 作者:Mo-Xian Chen,  Fu-Yuan Zhu,  Feng-Zhu Wang,  Neng-Hui Ye,  Bei Gao,  Xi Chen, Shan-Shan Zhao,  Tao Fan,  Yun-Ying Cao,  Tie-Yuan Liu,  Ze-Zhuo Su, Li-Juan Xie,  Qi-Juan Hu,  Hui-Jie Wu,  Shi Xiao,  Jianhua Zhang, Ying-Gao Liu 期刊:Journal of Experimental Botany 影响因子:5.36 PMID:30535157
《A novel Miscanthus NAC transcription factor MlNAC10 enhances drought and salinity tolerance in transgenic Arabidopsis》 作者:Kang He,Xun Zhao,Xiao yuanChi,Yiping Wang,Chunlin Jia,Hongpeng Zhang,Gongke Zhou,Ruibo Hu 期刊:J. Plant Physiol. 影响因子:2.825 PMID:30623878

北京索莱宝科技有限公司是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业。

总部位于北京，并在全国设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“Solarbio”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念，拥有专业的研发和质量检测团队以及的仓储和物流系统。“Solarbio”已经得到全国科研工作者的认可，成为广大经销商推崇的。

公司拥有一批专业的研发人员，我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广，品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时，索莱宝公司提供各种常规生化试剂，库存常备产品多达10000多种，可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面，索莱宝谨记公司信念：质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程，科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序，我们恪守对每一位用户的承诺：用专业的态度做专业的品牌。同时，公司组建了一支专业的技术服务队伍，能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买索莱宝产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。

索莱宝公司坚持与接轨，注重和企业的合作与交流，并提供产品代理、市场咨询等多项服务。公司将一如既往与世界更多合作，不断为广大生物科研工作者提供更优质的产品和服务。公司理念：“为科研服务，为生命尽责”。一个人能够走多远，取决于与谁同行。索莱宝公司期待与各同行精诚合作。 

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