甘油三酯(TG)含量检测试剂盒

操作步骤：

一、 TG 的提取：

1、 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清待测。

2、 细胞、细菌：先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加 1mL 试剂一，超声波破碎 1min（强度 20％，超声 2s，停 1s），8000g， 4℃离心 10min，取上清待测。

3、 血清（浆）等液体样品：直接测定。

二、 测定操作：

1. 分光光度计预热 30min，调节波长到 420 nm，蒸馏水调零。

2. 水浴锅预热到 65℃。空白管 标准管 测定管双蒸水（μL） 40 标准液（μL） 40 TG 待测液（μL） 40 试剂一（μL） 125 125 125 试剂二（μL） 25 25 25 加试剂一后充分混匀，再加试剂二，剧烈振荡 30s，静置，待分层后取上层溶液 30μL，置于新的 EP 管中。

3．甘油三酯含量测定：空白管 标准管 测定管上层溶液（μL） 30 30 30 试剂三 （μL） 100 100 100 试剂四（μL） 30 30 30 充分混匀，65℃水浴 3min 试剂五（μL） 100 100 100 试剂六（μL） 100 100 100 充分混匀，65℃水浴 15min 取出 200μL 于微量石英比色皿/96 孔板测定 420nm 处吸光度，记为 A 空，A 标和 A 测。注意：空白管和标准管只需测定一次。

甘油三酯(TG)含量检测试剂盒

a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下

1. 血清（浆）中甘油三酯含量： TG 含量（mg/dL）=C 标准品×（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）×100 mL =100×（A 测－A 空）÷（A 标－A 空） C 标准品：1mg/mL；100mL：血清体积，1dL=100 mL。

2. 组织中甘油三酯含量： (1)按样本蛋白浓度计算 TG 含量（mg/ mg prot）= C 标准品×（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）÷Cpr =（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）÷ Cpr (2)按样本质量计算 TG 含量（mg/ g）=C 标准品×（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）÷W =（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）÷ W C 标准品：1mg/mL ；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g/mL

3. 细胞、细菌中甘油三酯含量： TG 含量（mg/104 cell）=C 标准品×（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）÷细菌或细胞（104 cell /mL） =（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）÷细菌或细胞（104 cell /mL） C 标准品：1mg/mL。

b.使用 96 孔板测定的计算公式如下

1. 血清（浆）中甘油三酯含量： TG 含量（mg/dL）=C 标准品×（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）×100 mL =100×（A 测－A 空）÷（A 标－A 空） C 标准品：1mg/mL；100mL：血清体积，1dL=100 mL。

2. 组织中甘油三酯含量： (1)按样本蛋白浓度计算 TG 含量（mg/ mg prot）= C 标准品×（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）÷Cpr =（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）÷ Cpr (2)按样本质量计算 TG 含量（mg/ g）=C 标准品×（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）÷W =（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）÷ W C 标准品：1mg/mL ；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g/mL

3. 细胞、细菌中甘油三酯含量： TG 含量（mg/104 cell）=C 标准品×（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）÷细菌或细胞（104 cell /mL） =（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）÷细菌或细胞（104 cell /mL） C 标准品：1mg/mL。

注意事项：

1. 试剂盒中有易挥发性物质，实验过程中需佩戴手套和口罩，试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。

2. 加试剂二后需剧烈震荡，使待测液中甘油三酯得到充分提取。

3. 检出限为 100μ mol/L。

试剂一：自备，取玻璃空瓶，加入 45mL 正庚烷，80mL 异丙醇，盖紧后混匀，4℃保存。

剂二：液体 3mL×1 瓶，4℃保存。

试剂三：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。

试剂四：液体 3mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂五：液体 10mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂六：液体 10mL×1 瓶，4℃避光保存。标准品：液体 5mL×1 瓶，1mg/mL 甘油三酯标准溶液，4℃保存。

相关文献:

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