

产品简介
                索莱宝科技有限公司备有染色液类产品吖啶橙(AO)荧光染色试剂盒,吖啶橙染色试剂盒(Acridine Orange Detection Kit)主要由AO Stain、AO Stain Buffer组成,常用于细胞凋亡的检测。 AO荧光染色试剂盒
产品内容:
| 试剂名称 | 100T | Storage | 
| 试剂(A): AO Stain | 500ul | 2-8℃,避光 | 
| 试剂(B): AO Stain Buffer(10×) | 10mL | 2-8℃ | 
产品说明:
AO属于三环杂芳香燃料,可以标记DNA、RNA,属于异染性荧光染料。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。因此AO常用于细胞内DNA和RNA进行检测。AO与核酸结合方式主要有:1、插入性结合,AO嵌入核酸双链的碱基对之间,这种结合方式主要为AO与DNA的结合,其荧光发射峰为530nm,激发后呈绿色荧光;2、静电吸引,带正电荷的AO与单链核酸的磷酸根(带负电荷)产生静电间的吸引结合,这种结合方式主要为AO与RNA的结合,其荧光发射峰为640nm,激发后呈红色荧光,少量结合会呈桔黄色或桔红色荧光。因此,AO嵌合到双链DNA分子中显绿色,与DNA单链或RNA结合时发桔黄色或橙红色荧光。
AO荧光染色试剂盒(AO Detection Kit)主要由AO Stain、AO Stain Buffer组成,常用于细胞凋亡的检测。染色后在荧光显微镜下观察,AO可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。AO使其染上致密浓染的黄绿色荧光或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。AO染色常与EB染色合用双染,EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
自备材料:
荧光显微镜,低速离心机,PBS,细胞计数板,载玻片、盖玻片
操作步骤(仅供参考):
(一) AO单独染色
1、 收集细胞(采用流式细胞仪检测时,应先固定细胞),用AO Stain Buffer(1×)清洗细胞1次,加入适量的AO Stain Buffer(1×)重悬细胞,计数并调节细胞浓度至106/ml。
2、 取适量的细胞悬液和AO Stain,按照细胞悬液:AO Stain=19:1的比例混合,轻轻混匀。如果采用荧光显微镜下观察,一般取95μl细胞悬液和5μl AO Stain混合即可。
3、 室温避光染色15min,滴加于载玻片上并加盖玻片或上流式细胞仪分析。
4、 荧光显微镜下观察(激发滤光片波长488nm,阻断滤光片波长515nm),计数并拍照。
染色结果:
| 正常细胞 | 细胞被均匀染成黄绿色荧光 | 
| 凋亡细胞 | 染色质浓缩,细胞核碎裂成点状,被染成大小不一、致密浓染的绿色颗粒 | 
(二) AO/EB双染色
1、 收集细胞,用AO Stain Buffer(1×)清洗细胞1次,加入适量的AO Stain Buffer(1×)重悬细胞,计数并调节细胞浓度至106/ml。
2、 取适量的细胞悬液和AO Stain,按照细胞悬液:AO Stain=19:1的比例混合,并加入适量EB染色液,轻轻混匀。如果采用荧光显微镜下观察,一般取95μl细胞悬液和5μl AO Stain混合即可。
3、 室温避光染色15min,滴加于载玻片上并加盖玻片
4、 荧光显微镜滤光片515nm观察,计数并拍照。
染色结果:
| 正常细胞 | 均匀染成绿色荧光 | 
| 坏死细胞 | 细胞桔黄色荧光 | 
| 凋亡细胞 | 染色质浓缩,细胞核碎裂,被染成大小不一、致密浓染的黄绿色颗粒或见胞质芽状突起。 | 
计算细胞凋亡率和死亡率:
细胞死亡率=凋亡细胞/细胞总数×100% 细胞坏死率=坏死细胞/细胞总数×100%
注意事项:
1. AO染色常不EB染色合用,可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
2. 如有低温离心机进行离心效果更佳,同时应注意减少试剂暴露于强光下的时间。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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标题:Preparation of aloe polysaccharide/honey/PVA composite hydrogel: Antibacterial activity and promoting wound healing
成员:Qi Zhang, Miao Zhang, Teng Wang, Xiangyan Chen, Quancai Li, Xia Zhao
论文因子:8.025 发表期刊:INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOLOGICAL MACROMOLECULES pmid:35568151
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标题:Mn-single-atom nano-multizyme enabled NIR-II photoacoustically monitored, photothermally enhanced ROS storm for combined cancer therapy
成员:Wang Xiaozhe, Ren Xiaofeng, Yang Jie, Zhao Zican, Zhang Xiaoyu, Yang Fan, Zhang Zheye, Chen Peng, Li Liping, Zhang Ruiping
论文因子:11.3 发表期刊:Biomaterials Research pmid:38049922
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标题:Butylparaben induced zebrafish (Danio rerio) kidney injury by down-regulating the PI3K-AKT pathway
成员:Lirong Huang, Jiaxin Xu, Kun Jia, Yulin Wu, Wei Yuan, Zhipeng Liao, Bo Cheng, Qiang Luo, Guiyou Tian, Huiqiang Lu
论文因子:13.6 发表期刊:JOURNAL OF HAZARDOUS MATERIALS pmid:38565019
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标题:Fluorofenidone alleviates liver fibrosis by inhibiting hepatic stellate cell autophagy via the TGF-汕1/Smad pathway: implications for liver cancer
成员:Xiongqun Peng, Huixiang Yang, Lijian Tao, Jingni Xiao, Ya Zeng, Yueming Shen, Xueke Yu, Fei Zhu, Jiao Qin
论文因子:2.7 发表期刊:PeerJ pmid:37790613
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标题:The antipsychotic drug pimozide promotes apoptosis through the RAF/ERK pathway and enhances autophagy in breast cancer cells
成员:Ge Jiang, Xingzhi Zhou, Ye Hu, Xiaoyu Tan, Dan Wang, Lina Yang, Qinggao Zhang, Shuangping Liu
论文因子:3.6 发表期刊:CANCER BIOLOGY & THERAPY pmid:38356266
注意:以上文献 仅供参考
AO荧光染色试剂盒
AO荧光染色试剂盒