产品名称:谷氨酸(Glu)含量检测试剂盒
产品型号:BC1580
产品特点:谷氨酸(Glu)含量检测试剂盒Glu广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,不仅是组成蛋白质的20种氨基酸之一,而且通过转氨基作用参与多种氨基酸合成,是生物体内主要氨基来源之一。
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产品规格:50管/48样 产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存; 参考价格:360
库存状态:现货
关键字: : 谷氨酸检测试剂盒|Glu检测试剂盒|谷氨酸|试剂盒
简要介绍:
Glu广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,不仅是组成蛋白质的20种氨基酸之一,而且通过转氨基作用参与多种氨基酸合成,是生物体内主要氨基来源之一。此外,Glu还是味精的主要有效成分,常用做食品添加剂以及香料生产。
谷氨酸脱氢酶(GDH)催化谷氨酸和NAD生成α-酮戊二酸、NADH和NH4+,引起340nm处吸光度的上升,通过测定340nm吸光度的变化,计算谷氨酸含量。
产品详细描述
产品内容:
试剂一:液体100mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:液体5mL×1瓶,4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存,临用前加入40mL试剂一;
试剂四:粉剂×1瓶,-20℃保存,临用前加入2.5mL 试剂二;
标准品:液体0.5mL×1支,4℃保存。10μmol/mL 谷氨酸标准品。
产品说明:
Glu广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,不仅是组成蛋白质的20种氨基酸之一,而且通过转氨基作用参与多种氨基酸合成,是生物体内主要氨基来源之一。此外,Glu还是味精的主要有效成分,常用做食品添加剂以及香料生产。
谷氨酸脱氢酶(GDH)催化谷氨酸和NAD生成α-酮戊二酸、NADH和NH4+,引起340nm处吸光度的上升,通过测定340nm吸光度的变化,计算谷氨酸含量。
试验中所需的仪器和试剂:
紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
操作步骤:
一、谷氨酸提取
细菌、细胞或组织样品:收集细胞或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每1000万细菌或细胞加入1mL试剂一,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次),10000rpm,常温离心10min,取上清待测。
称取约0.1g组织,加入1mL试剂一进行冰浴匀浆,10000 rpm,常温离心10min,取上清待测。
二、测定步骤
将标准品分别稀释为2.5、1.25、0.625、0.313、0.156、0.078、0.039μmol/mL的标准溶液。
(1)标准管:在1 mL石英比色皿中加入200μL标准溶液、800μL试剂三和50μL试剂四混匀,立即记录340nm处20s时的吸光值为A1和5min20s时的吸光值A2,计算∆A=A2-A1。
(2)测定管:在1 mL石英比色皿中加入200μL样本、800μL试剂三和50μL试剂四混匀,立即记录340nm处20s时的吸光值为A1和5min20s时的吸光值A2,计算∆A=A2-A1。
三、谷氨酸含量计算
以谷氨酸含量(µmol/mL)为x轴,标准管∆A为y轴,绘制标准曲线y=kx+b。将测定管∆A带入方程得到x值。
2、氨基酸含量计算:
(1)按照蛋白浓度计算
谷氨酸含量(µmol/mg prot)=x×V样本÷(Cpr×V样本)=x÷Cpr。
(2)按照样品质量计算
谷氨酸含量(µmol/g鲜重)=x×V样本÷(W÷V样总×V样本)=x÷W。
(3)按照细菌或细胞密度计算
谷氨酸含量(μmol/104 cell)=x×V样本÷(1000÷V样总×V样本)=0.001x。
V样总:加入提取液体积,1mL;V样本:加入的样本体积,0.2mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g;1000:细菌或细胞总数,1000万。
注意事项:
为提高检测灵敏度,测定管的吸光值应小于1且∆A小于0.4,若大于此值则需要将上清液用试剂一稀释适当倍数后测定。
谷氨酸(Glu)含量检测试剂盒
相关文献:
《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng,Yanyan Li,Muhammad Ali Abid,Muhammad Askari,Peilin Wang,Yuan Wang,Guoqing Sun,Yongping Cai,Shou-Yi Chen,Yi Lin,Rui Zhang,Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影响因子:3.712 PMID:
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