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产品名称:线粒体呼吸链复合体Ⅲ活性测定试剂盒

产品型号:BC3245

产品报价:

产品特点:线粒体呼吸链复合体Ⅲ活性测定试剂盒
品牌:Solarbio | 货号:BC3245
检测方法 : 微量法
规格:100管/96样

免费咨询:010-50973185

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BC3245线粒体呼吸链复合体Ⅲ活性测定试剂盒的详细资料:

线粒体呼吸链复合体Ⅲ活性测定试剂盒

试验中所需的仪器和试剂:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微玻璃比色皿/96 孔板(非 聚苯乙烯材质)、研钵、冰和蒸馏水。
复合体Ⅲ的提取:

① 称取约0.1g组织或收集500万细胞,加入1.0 mL提取液,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。

② 4 ℃ 600 g离心10min。

③ 将上清液移另一离心管中,4 ℃ 11000 g离心15min。

④ 上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅲ(此步可选做,可以判断线粒体提 取效果)。

⑤ 在沉淀中加入200uL提取液,超声波破碎(功率20%,超声5秒,间隔10秒,重复15次),用于 复合体Ⅲ酶活性测定,并且用于蛋白含测定。

注意事项:

1、尽保持比色皿内反应液温度在37℃或25℃。可以在记录初始吸光度A1后迅速将比色皿连同反 应液一起放入37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴中准确反应2分钟,之后迅速取出比色 皿并擦干,记录2min时的吸光度。

2、当测定吸光值大于1时,建议将样品用提取液稀释后测定,计算公式中注意乘以稀释倍数。

3、此法需要自行测定样本蛋白质浓度,推荐本公司BCA蛋白浓度含测定试剂盒。

4、由于提取液中含有蛋白,所以在测定样品蛋白浓度时需要去提取液本身的蛋白含(单独测定)。

5、推荐使用样本蛋白浓度计算酶活,若用样本鲜重计算,则需加测胞浆提取物酶活,上清和沉淀 酶活之和方为总酶活。

6、本试剂盒试剂足够完成 100 管反应。

7、附:使用样本重计算公式:(样本检测数为 100T/24S)

相关文献:

《Weanling Offspring of Dams Maintained on Serine-Deficient Diet Are Vulnerable to Oxidative Stress》 作者:Liuqin He, Haiwen Zhang, and Xihong Zhou 期刊:Oxidative Medicine and Cellular Longevity 影响因子:4.868 PMID:30305866
《A Damaged Oxidative Phosphorylation Mechanism Is Involved in the Antifungal Activity of Citral against Penicillium digitatum》 作者:Qiuli OuYang, Nengguo Tao* and Miaoling Zhang 期刊:Frontier in Immunology 影响因子:4.259 PMID:29503638
 

线粒体呼吸链复合体Ⅲ活性测定试剂盒

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