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产品名称:还原型谷胱甘肽(GSH)含量检测试剂盒 常量

产品型号:BC1170

产品报价:

产品特点:还原型谷胱甘肽(GSH)含量检测试剂盒 常量
测定意义:GSH 是细胞内主要的抗氧化巯基物质,在抗氧化、蛋白质巯基保护和氨基酸跨膜运输等中具有重要作用。还原型与氧化型比值(GSH/GSSG)是细胞氧化还原状态的主要动态指标。因此,测定细胞内 GSH 和 GSSG 含量以及 GSH/GSSG 比值,能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。

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BC1170还原型谷胱甘肽(GSH)含量检测试剂盒 常量的详细资料:

 

产品名称还原型谷胱甘肽(GSH)含量检测试剂盒 常量

产品英文名 Reduced Glutathione (GSH) Assay Kit

产品货号:BC1170                 产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格:50管/48样                 产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存;            参考价格:240
库存状态:现货                          
关键字:还原型谷胱甘肽试剂盒|活性检测试剂盒|GSH含量检测|试剂盒


简要介绍:
GSH 是细胞内主要的抗氧化巯基物质,在抗氧化、蛋白质巯基保护和氨基酸跨膜运输等中具有重要作用。还原型与氧化型比值(GSH/GSSG)是细胞氧化还原状态的主要动态指标。因此,测定细胞内 GSH 和 GSSG 含量以及 GSH/GSSG 比值,能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。 
    DTNB 与 GSH 反应生成复合物,在 412nm 处有特征吸收峰;其吸光度与 GSH 含量成正比。 


产品详细描述
产品内容:
试剂一:液体1瓶,50mL,4℃保存。
试剂二:液体1瓶,50 mL,4℃保存。
试剂三:液体1瓶,15 mL,4℃避光保存。
标准品:粉剂1支,10mg,4℃避光保存。
产品说明:
谷胱甘肽是由谷氨酸(Glu)、半胱氨酸(Cys)和甘氨酸(Gly)组成的天然三肽,是一种含巯基(—SH)的化合物,广泛存在于动物组织、植物组织、微生物和酵母中。谷胱甘肽能和5,5’-二硫代--5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acidDTNB)反应产生2-硝基-5-巯基ben甲酸和谷胱甘肽二硫化物(GSSG)。2-硝基-5-巯基ben甲酸为黄色产物,在波长412nm处具有大光吸收。
自备仪器和用品:
分析天平、微量匀浆器(规格2ml)、低温离心机、水浴锅、移液器、可见分光光度计1ml比色皿。
样品的处理
1、组织处理
新鲜组织先用PBS冲洗2次,然后称取动物组织或者植物组织0.1g。加入用试剂一润洗过的匀浆器中(匀浆器提前放冰上预冷);然后加入1ml试剂一(组织/试剂一比例保持不变即可),迅速冰上充分研磨(使用液氮研磨效果更好);8000g 4℃离心10min;取上清液放置于4℃待测,若暂时不能完成测试可放于-80℃保存(可保存10天)。
2、血液处理
血浆将收集的抗凝血于4℃,600g离心10分钟,吸取上层血浆到另一支试管中,加入等体积的试剂一, 4℃,8000g离心10分钟,将上清移入新的试管中放置于4℃待测,若暂时不能完成测试可放于-80℃保存(可保存10天)。
血细胞:将收集的抗凝血于4℃,600g离心10分钟,弃去上层血浆用3倍体积的PBS清洗3次(用PBS重悬血细胞,600g离心10分钟),加入等体积试剂一,混匀后4℃放置10分钟,8000g离心10分钟,吸取上清放于4℃待测,若暂时不能完成测试可放于-80℃保存(可保存10天)。
3、细胞处理
收集不少于106个细胞,先用PBS清洗细胞2次(PBS重悬细胞,600g离心10分钟),加入3倍细胞沉淀体积的试剂一重悬细胞,反复冻融2-3次(可在液氮中冻结,37℃水浴中溶解),8000g离心10分钟,收集上清于4℃待测,若暂时不能完成测试可放于-80℃保存(可保存10天)。
操作步骤

  1. 分光光度计预热30min以上,分光光度计调节波长412nm,蒸馏水调零。
  2. 试剂二放置37℃(哺乳动物)或25℃(一般物种)水浴中保温30min
  3. 空白管检测:取1ml比色皿,依次加入100μL蒸馏水,700μL试剂二,200μL试剂三,混匀,放置2min后测定412nm吸光度A1
  4. 制作标准曲线

1mg标准品用1ml蒸馏水溶解,浓度为1mg/ml。取适当溶液配制浓度为200μg/ml100μg/ml50μg/ml25μg/ml12.5μg/ml的标准品(试剂一十倍稀释后进行稀释)。
1.5mlEP管依次加入100μL标准品700μL试剂二,200μL试剂三,每管混匀后静置2min,检测412nm处吸光度,吸光度减去空白孔(A1)为横坐标,根据吸光度(x)和浓度(y,μg/ml)做出标准曲线。

  1. 样品管测定:取1ml比色皿,依次加入100μL样品,700μL试剂二,200μL试剂三,混匀后静置2min检测412nm处吸光度A2A= A2- A1

GSH含量计算
根据标准曲线,将样品A带入公式中(x),计算出样品浓度y(μg/ml)。
1)按蛋白浓度计算 
GSHμg / mg prot=y×V 反总÷V ÷Cpr =y×10÷Cpr
2)按样本质量计算 
GSHμg /g= y×V 反总÷(V ÷V 样总×W)= y×10 ÷W
3)按细胞数量计算 
GSHμg /104 cell= y×V 反总÷(V ÷V 样总×细胞数量)= y×10 ÷细胞数量 
4)按液体体积计算 
GSHμg / mL= y×V 反总÷V = y×10
V 反总:反应总体积,1mLV 样总:上清液总体积,1 mLV 样:加入反应体系中上清液体积,100μL=0.1 mLW:样品质量,g Cpr:上清液蛋白质浓度,mg/mL 
注意事项

  1. 样品处理需匀浆*,若当天不能完成测量,可放-80℃保存。
  2. 标准品:还原型谷胱甘肽现配现用。
  3. 若不确定样品中GSH含量的高低,可稀释几个梯度后再进行测量。
  4. 因为试剂中含有蛋白质沉淀剂,因此上清液不能用于蛋白浓度测定。

相关文献:
《Trimetazidine restores the positive adaptation to exercise training by mitigating statin‐induced skeletal muscle injury》 作者:Ming Song , Fang‐fang Chen , Yi‐hui Li,  Lei Zhang , Feng Wang,  Ran‐ran Qin  ,Zhi‐hao Wang , Ming Zhong , Meng‐xiong Tang , Wei Zhang , Lu Han 期刊:Journal of Cachexia, Sarcopenia and Muscle 影响因子:10.754 PMID:29152896
《Composition Analysis by UPLC-PDA-ESI (?)-HRMS and Antioxidant Activity Using Saccharomyces cerevisiae Model of Herbal Teas and Green Teas from Hainan》 作者: Hua Li, Lanying Wang and Yanping Luo 期刊:molecules 影响因子:3.06 PMID:30301226
《MicroRNA-98 reduces amyloid β-protein production and improves oxidative stress and mitochondrial dysfunction through the Notch signaling pathway via HEY2 in Alzheimer's disease mice》 作者:Fang?Zhou Chen Ying Zhao Hui?Zhao Chen 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影响因子:2.928 PMID:30365070
《Inhibition of MUC1‐C regulates metabolism by AKT pathway in esophageal squamous cell carcinoma》 作者:Xin GongSun  YongQiang Zhao  Bin Jiang  ZhongWei Xin  Mo Shi  Liang Song  QiMing Qin  Qiang Wang  XiangYan Liu 期刊:J. Cell. Physiol. 影响因子:4.522 PMID:30523643
《Light-Responsive Metal–Organic Framework as an Oxidase Mimic for Cellular Glutathione Detection》 作者:Yufeng Liu,Min Zhou,Wen Cao,Xiaoyu Wang,Quan Wang,Sirong Li and Hui Wei 期刊:Anal Chem. 影响因子:6.35 PMID:31148448
 

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