抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性检测试剂盒

产品名称:：  抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性检测试剂盒

产品英文名: Ascorbate Peroxidase (APX) Assay Kit

产品货号：BC0220           产地：北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格：50管/48样             产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            参考价格：720
库存状态：现货                          
关键字:  抗坏血酸过氧化物酶检测试剂盒|APX检测试剂盒|抗坏血酸过氧化物酶|试剂盒

简要介绍：
APX 是植物清除活性氧的重要抗氧化酶之一，也是抗坏血酸代谢的关键酶之一。APX具有多种同功酶，分别定位于叶绿体、胞质、线粒体、过氧化物和乙醛酸体，以及过氧化体和类囊体膜上。APX 催化H2O2 氧化AsA，是植物AsA的主要消耗者。APX 的活性直接影响到AsA 的含量，在胁迫和解胁迫条件下，APX 与AsA 具有一定的负相关性。
    APX催化H2O2氧化AsA，通过测定AsA 的氧化速率，可计算得APX 活力。


产品详细描述
产品内容：
试剂一：液体90mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入5mL双蒸水充分溶解；
试剂三：液体5 mL×1瓶，4℃保存。
产品说明：
APX 是植物清除活性氧的重要抗氧化酶之一，也是抗坏血酸代谢的关键酶之一。APX具有多种同功酶，分别定位于叶绿体、胞质、线粒体、过氧化物和乙醛酸体，以及过氧化体和类囊体膜上。APX 催化H₂O₂ 氧化AsA，是植物AsA的主要消耗者。APX 的活性直接影响到AsA 的含量，在胁迫和解胁迫条件下，APX 与AsA 具有一定的负相关性。
APX催化H₂O₂氧化AsA，通过测定AsA 的氧化速率，可计算得APX 活力。
试验中所需的仪器和试剂：
低温离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、移液枪、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取 ：   
按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。13000g，4℃离心20min，取上清置冰上待测。
二、测定操作表：

1. 分光光度计预热30 min以上，调节波长到290 nm，用蒸馏水调零。
2. 试剂一在25℃中预热30min以上。
3. 空白管：依次在1mL石英比色皿中加入100μL蒸馏水、700μL预热的试剂一、100μL试剂二和100μL试剂三，迅速混匀后在290nm测定10 s和130 s光吸收A1和A2，△A空白管=A1-A2。
4. 测定管：依次在1mL石英比色皿中加入100μL上清液、700μL预热的试剂一、100μL试剂二和100μL试剂三，迅速混匀后在290nm测定10 s和130 s光吸收A3和A4，△A测定管=A3-A4。

三、APX 活力计算：
(1) 按样本蛋白浓度计算
活性单位定义：每毫克蛋白每分钟氧化1μmol AsA 为1U。
APX(U/mg prot) = (△A测定管-△A空白管)÷(ε×d）×V反总×10⁶÷(Cpr×V样)÷T
=1.79×(△A测定管-△A空白管) ÷ Cpr
    ε：AsA在290nm处摩尔吸光系数为2.8×10³L/mol/cm；d：比色皿光径（cm），1 cm；V反总：反应体系总体积（L），1000μL=1×10^-3 L；10⁶：1mol=1×10⁶μmol；Cpr：上清液蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定，建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒；V样：加入反应体系中上清液体积（mL），100μL=0.1 ml；T：催化反应时间（min），2min。
（2）按样本质量计算
单位的定义：每g组织每分钟氧化1μmol AsA 为1U。
APX(U/g ) = (△A测定管-△A空白管)÷(ε×d）×V反总×10⁶÷(W×V样÷V样总)÷T
=1.79×(△A测定管-△A空白管) ÷W
ε：AsA在290nm处摩尔吸光系数为2.8×10³ L/mol/cm；d：比色皿光径（cm），1 cm；V反总：反应体系总体积（L），1000μL=1×10^-3 L；10⁶：1mol=1×10⁶μmol；V样：加入反应体系中上清液体积（mL），100μL=0.1 mL；V样总：加入试剂一体积，1mL；W，样本质量，g；T：催化反应时间（min），2min。
 

 相关文献：

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