A． 本分离液是敏光型的，在运输和贮藏过程中应在 18℃-25℃避光保存，启封后置 4

℃保存避免微生物污染。另外，本品为真空包装，未启封前置于 10℃ 以下易出现白色结晶，

影响分离效果。

B． 待分离的血液、组织及细胞要求新鲜，避免冷冻和冷藏。分离液和所分离样本一

定在20℃水浴箱中复温20分钟保证分离液和所分离样本温度在20℃±2℃时分离效果，

且所有操作过程一定要在无菌条件下进行。

C． 由于各品牌离心机的性能不同，国内南北地区温度环境和四季的差异，可能影响

分离效果，用户可以调节离心转数，调节离心的时间，摸索佳的分离条件（具体分离条件

各实验室自定）。

D． 使用无静电反应的离心管，推荐使用未经过碱处理的玻璃离心管。

E． 优抗凝剂选择：EDTA、枸橼酸、肝素。应注意在血液稀释过程中应去除抗凝剂

体积。

F． 分离过程中所用其他试剂如：羟乙已基淀粉 550、全血及组织稀释液、细胞洗涤液及红细

胞裂解液等以我公司产品为优选择，本公司相关系列产品无菌、无病毒、无支原体、低内

毒素水平且无细胞毒性，所获得的细胞可保持完好的生物活性和完整的细胞形态。

4. 应. 用

适用于从动物血液或脏器组织中分离单核细胞。

5.. . . 产品性能指标

pH 7.0-7.5

渗透压 280-340mOsmol/kg

内毒素 ≤0.5...EU/ml

无菌 直接接种培养 14 天后培养基澄清

澄明度及不溶性颗粒物 每 50ml 溶液中含 10μm 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 20 粒以下，，，

含 25μm 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 5 粒以下

6.

7. 实验前准备 7. 实验前准备

A． 试剂

单核细胞分离液试剂盒所含试剂、组织匀浆液、羟乙已基淀粉 550、胎牛血清

B． 器材

玻璃离心管、玻璃滴管

水平转子离心机、无菌工作台

8. 各种动物 8. 各种动物单核细胞分离液试剂盒使用方法说明及图例

A. 在 10ml 或 15ml 玻璃离心管中依次小心加入 A、D 两种液体各 2ml,制成梯度界面（各液面分层一定要清晰）；

B． 取 1ml新鲜抗凝血按1：1比例与全血及组织稀释液混匀并小心叠加于D液之液面上；或将组织单细胞悬液（细胞浓度为2×108

-1×109个/ml，制备方法详见“10.组织单细胞悬液的制备方法”）叠加于D液之液面上；

C. 以400g（约1500转/分）离心15分钟(半径15cm水平转子)；

此时离心管中由上下细胞分为六层。*层；为血浆（稀释液）层。第二层；；；为；单核

细胞层。。。第三层；为透明 D 液层。第四层；为淋巴细胞层。第五层；为透明 A 液层。第六层；

为极少量红细胞层。收集第二层单核细胞放入含 4-5ml 细胞洗涤液的试管中，充分混匀后，

以 500g（约 1800 转/分）离心 20 分钟，弃去上清留沉淀细胞重新悬起。重复洗涤 2 次即得所需单核细胞。

注：：A. 提取率约为 80%。