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产品名称:谷丙转氨酶(GPT)活性检测试剂盒

产品型号:BC1550

产品报价:

产品特点:谷丙转氨酶(GPT)活性检测试剂盒
测定意义:GPT(EC 2.6.1.2)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化氨基酸和酮酸转氨基反应,在氨基酸代谢中具有重要作用。此外,哺乳动物肝细胞GPT 活性很高,当肝细胞坏死,GPT 释放到血液中,血清GPT 活性显著增高。因此,GPT 被世界卫生组织推荐为肝功能损害敏感的检测指标

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BC1550谷丙转氨酶(GPT)活性检测试剂盒的详细资料:

谷丙转氨酶(GPT)活性检测试剂盒

 

产品名称:谷丙转氨酶(GPT)活性检测试剂盒

产品英文名:  Glutamic-pyruvic Transaminase(GPT)Assay Kit

产品货号:BC1550              产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格:50管/24样           产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存;            参考价格:130
库存状态:现货                          
关键字:   谷丙转氨酶检测试剂盒|GPT检测试剂盒|谷丙转氨酶|试剂盒

简要介绍:
GPT(EC 2.6.1.2)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化氨基酸和酮酸转氨基反应,在氨基酸代谢中具有重要作用。此外,哺乳动物肝细胞GPT 活性很高,当肝细胞坏死,GPT 释放到血液中,血清GPT 活性显著增高。因此,GPT 被世界卫生组织推荐为肝功能损害敏感的检测指标。
    GPT 催化丙氨酸和α-酮戊二酸发生转氨基反应,生成丙
tong酸和谷氨酸;加入2,4-二硝基ben肼溶液,不仅终止上述反应,而且与酮酸中的羰基加成,生成丙tong酸苯腙;苯腙在碱性条件下呈红棕色,可以在505nm 读取吸光值并计算酶活力。


产品详细描述
产品内容:
提取液:30mL×1瓶,4保存
试剂一:液体8mL×1瓶,4保存;
试剂二:液体8 mL×1瓶,4保存;
试剂三:液体80mL×1瓶,4保存;
标准品:液体1mL×1支,20μmol/mL丙tong酸钠标准品,4保存。
产品说明:
GPT(EC 2.6.1.2)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化氨基酸和酮酸转氨基反应,在氨基酸代谢中具有重要作用。此外,哺乳动物肝细胞GPT活性很高,当肝细胞坏死,GPT释放到血液中,血清GPT活性显著增高。因此,GPT被世界卫生组织推荐为肝功能损害敏感的检测指标。
GPT催化丙氨酸和α-酮戊二酸发生转氨基反应,生成丙tong酸和谷氨酸;加入2,4-二硝基ben肼溶液,不仅终止上述反应,而且与酮酸中的羰基加成,生成丙tong酸苯腙;苯腙在碱性条件下呈红棕色,可以在505nm读取吸光值并计算酶活力。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样品测定的准备
1、细胞或微生物样品的制备:
先收集细胞或微生物样品到离心管内,弃上清,按照每500万细胞或微生物加入1mL提取液超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次)3500g4离心10min,取上清,置冰上待测。
2、组织:
称取约0.1g组织加入1mL提取液进冰浴行匀浆。3500g  4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3、血清(浆)样品:直接检测。
二、测定操作表:

  1. 分光光度计预热30min以上,调节波长505nm,蒸馏水调零。
  2. 标准曲线的测定

先将标准品稀释2μmol/mL按下表混合标准品和试剂一得到浓度梯度标准管:
 

标准品(μL)试剂一(μL)标准管浓度(μmol/mL)
90301.5
60601
45750.8
36840.6
24960.4
121080.2
61140.1
31170.05
01200
  1. 在EP管中加入下列试剂
试剂名称(μL测定管对照管标准管
待测样本20  
试剂一100100 
标准液  120
混匀后,37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热30min
试剂二100100100
待测样本 20 
混匀后,37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)准确水浴20min
试剂三100010001000
混匀,室温放置10min,在505nm波长处,测各管吸光度。


注:0μmol/mL 标准管为空白管。
三、计算

  1. 标准曲线的绘制:

以各标准溶液浓度为x轴,以∆A(A标准管-A空白管)为y轴做标准曲线,得到方程y=kx+b。将(A测定管-A对照管)带入方程求x值。

  1. GPT活性计算:

(1)按样本鲜重计算:
单位定义:每小时每g鲜重样品催化产生1μmol丙tong酸的量为一个GPT活力单位。
GPT(U/g鲜重)=x×(V样本+V试剂一)÷(W×V样本÷V样总)÷T=12x÷W。
(2)按样本蛋白浓度计算:
单位定义:每小时每mg组织蛋白催化产生1μmol丙tong酸的量为一个GPT活力单位。
GPT(U/mg prot)=x×(V样本+V试剂一)÷(Cpr×V样本)÷T=12x÷Cpr。
(2)按血清体积计算:
单位定义:每小时每mL血清样品催化产生1μmol丙tong酸的量为一个GPT活力单位。
GPT(U/mL)=x×(V样本+V试剂一)÷V样本÷T=12x
V样本:样本体积,0.02mL;V试剂一:试剂一体积,0.1mL;V样总:提取液体积,1mL;W:样本鲜重,g;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;T:反应时间,0.5h。

相关文献:
《Hydroxychloroquine induced lung cancer suppression by enhancing chemo-sensitization and promoting the transition of M2-TAMs to M1-like macrophages》 作者:Yong Li, Fengjun Cao, Mingxing Li, Pindong Li, Yuandong Yu, Longchao Xiang, Tao Xu, Jinhua Lei, Yun Yan Tai, Jianyong Zhu, Bingbing Yang, Yingpin Jiang, Xiufang Zhang, Long Duo, Ping Chen & Xiongjie Yu  期刊:Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 影响因子:5.646 PMID:30373678

 

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