Masson 三色染色试剂盒

Masson 三色染色是结缔组织染色知更鸟经典的一种方法，是显示组织中纤维的主要方法之一，是胶原纤维染色而经典的技术方法。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量容易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构稀松的、渗透性高的组织。然而，淡绿或苯胺蓝的分子量很大，因此Masson染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。

Masson试剂盒的特点：◆染色稳定；◆分化时间短，1-2分钟；◆色彩清楚鲜艳；◆使用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；◆所染切片保存时间长且不易褪色。

产品组成：

试剂（A-1） 苏木素染色液 25ml

试剂（A-2） 三氯化铁水溶液 25ml

试剂（B） 盐酸乙醇分化液 50ml

试剂（C） 氨水水溶液 50ml

试剂（D） 丽春红酸性品红染色液 50ml

试剂（E） 乙酸水溶液 50ml

试剂（F） 磷钼酸水溶液 50ml

试剂（G） 苯胺蓝染色液 50ml

注：临用时取A1、A2等量混合，成为试剂A，不可预先配制后放置，因染色液的色素根与铁会化合。形成不容性沉淀，等量混合后，一般24小时后失去人力。

主要成分：

试剂（A）:主要由苏木素和三氯化铁组成。

试剂（B）:主要由乙醇和盐酸水溶液组成。

试剂（C）:主要由稀氨水水溶液组成。

试剂（D）:主要由丽春红和酸性品红组成。

试剂（E）:主要由乙酸水溶液组成。

试剂（F）:主要由磷钼酸水溶液组成。

试剂（G）:主要由苯胺蓝和弱酸组成。

操作步骤：

固定液应选用甲醛盐溶液、中性福尔马林试剂（10%，NBF）进行固定。

1、切片脱蜡水。

2、试剂（A）染色5min-10min。

3、试剂（B）分化、水洗。

4、试剂（C）返蓝、水洗。

5、蒸馏水或者去离子水洗1min。

6、试剂（D）染色5-10min。

7、试剂（E）洗1min。

8、试剂（F）洗1-2min

9、试剂（E）洗1min。

10、直接放入试剂（G）中染色1-2min。

11、试剂（E）洗1min。

12、95%乙醇快速脱水。

13、无水乙醇（1）5-10秒。

14、无水乙醇（2）5-10秒。

15、无水乙醇（3）5-10秒。

16、二jia苯（1）1-2分。

17、二jia苯（2）1-2分。

18、二jia苯（3）1-2分。

19、中性树胶封固。

染色结果：细胞核呈蓝色、胞浆、肌肉、红细胞呈红色，胶原纤维/蛋白呈蓝色。

注意事项：

1、切片脱蜡应尽量干净。

2、组织固定起着非常重要的作用，使用不同的固定液或缩短染色时间

3、经典masson三色染色中，常要求使用试剂A染核，也可用Harris 苏木精染核，但Harris 苏木精染核后切片颜色不够鲜艳，因为色目的主要在于区分胶原纤维和肌纤维，一般也可以省略该染色步骤。

4、试剂B的分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。

5、试剂E为0.2%乙酸水溶液，可使色彩更清楚鲜艳、如果使用量大可自行配制。

6、用试剂F分化要在镜下控制，分化到胶原纤维呈淡红色。纤维呈红色即可。分化时间根据染色深浅而定。一般1-2min。

7、返蓝液常使用氨水水溶液，亦可自行配制Scoot 促蓝液或0.1-1%碳酸锂水溶液。

8、戴一次性手套操作。

9、使用场所应通风，并远离火源。

储存条件：

2-25℃ 避光