产品名称:总糖含量检测试剂盒
产品型号:BC2710
产品特点:总糖含量检测试剂盒测定意义:糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。总糖也可称为碳水化合物,包括可溶性的单糖,二糖以及不溶性的淀粉,纤维素,几丁质等。测定原理:总糖酸水解为还原糖,在NaOH 和丙三醇存在下,DNS 试剂与还原糖共热后被还原成氨基化合物,在过量的NaOH 碱性溶液中呈桔红色,在540nm 处有大吸收峰,以此测定样品中的总糖含量。
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总糖含量检测试剂盒
总糖含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
英文名称:Total sugar content test kit
关键词:总糖含量检测|总糖含量测定|总糖|总糖含量
货号:BC2710
规格:50T/48S
产品内容:
试剂一:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:液体 13mL×1 瓶,4℃避光保存;
标准品:粉剂×1 支,10mg 无水葡萄糖,4℃保存;临用前加 1mL 蒸馏水溶解为 10mg/mL 的葡萄糖标准品备用。
产品说明:
糖类物质是构成植物体的重要成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。总糖主要指具有还原性的葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖,麦芽糖以及可能部分水解的淀粉。
总糖酸水解为还原糖,还原糖在碱性条件下与 DNS 试剂共热后被还原成氨基化合物,在碱性溶液中呈桔红色,还原糖的量与桔红色物质颜色的深浅成正比关系,以此测定样品中的总糖含量。
试验中所需的仪器和试剂:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、蒸馏水。
操作步骤:
一、样品中总糖的提取:
组织:称取约 0.1g 样品,加入 1mL 试剂一,1.5mL 蒸馏水,匀浆,沸水浴 30min,加入 1mL
试剂二,混匀,用蒸馏水定容 10mL,8000g 25℃离心 10min,取上清液待测。(注意稀释,见注意事项)
血清(浆)、液体样本:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.1mL 试剂一,0.15mL 蒸馏水,匀浆,沸水浴 30min,加入 0.1mL 试剂二,混匀,用蒸馏水定容 1mL,8000g 25℃离心 10min,取上清液待测。(注意稀释,见注意事项)
二、测定操作表:
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长 540nm,蒸馏水调零。
2、标准品准备:将标准品用蒸馏水稀释 1、0.8、0.6、0.5、0.4、0.2、0.1mg/mL。
3、加样表:
试剂(µL) 空白管 测定管 标准管
蒸馏水 150
样本 150
标准品 150
试剂三 150 150 150
混匀,沸水浴 10min(盖紧,以防止水分散失),冷却室温
蒸馏水 900 900 900
混匀,在 540nm 下测定吸光值,并计算∆A 测=A 测定管-A 空白管、∆A 标=A 标准管-A 空白管。
总糖含量计算:
1、标准曲线的绘制:
以标准管的浓度为x轴,对应的∆A标为y轴绘制标准曲线,得到标准方程y=kx+b,将∆A测带入方程中计算得x(mg/mL)。
2、按样本鲜重计算:
总糖(mg/g 鲜重)=(x×V 样总)÷W×稀释倍数=10×x÷W×稀释倍数
3、按血清(浆)、液体体积计算:
总糖(mg/mL)=(x×V 提)÷V 样×稀释倍数=10×x×稀释倍数
V 样总:样本体积总体积,10mL;
W:样本鲜重,g;
V 提:液体或血清样本总体积,1mL;
V 样:液体或血清体积,0.1mL。
注意:
1、空白管只需做一管。
2、如果∆A 大于 1.2,需要将上清液用蒸馏水稀释,计算公式中乘以相应稀释倍数。
3、此试剂盒对于纤维素的分解程度无法达到 100%。
注意:低检测限为 5mg/g 鲜重。
相关文献:
《Extraction of Extracellular Matrix in Static and Dynamic Candida Biofilms Using Cation Exchange Resin and Untargeted Analysis of Matrix Metabolites by Ultra-High-Performance Liquid Chromatography-Tandem Quadrupole Time-of-Flight Mass Spectrometry (UPLC-Q-TOF-MS)》 作者:Wenyue Da?, Jing Shao*?, Qianqian Li, Gaoxiang Shi, Tianming Wang, Daqiang Wu and Changzhong Wang* 期刊:FRONTIERS IN MICROBIOLOGY 影响因子:4.259 PMID:31110494
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