线粒体呼吸链复合体Ⅲ活性检测试剂盒

线粒体呼吸链复合体Ⅲ活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法

注意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
货号：BC3240
规格：25T/12S

产品内容：
提取液：液体 20mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 20mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1 支，-20℃保存；
试剂三：液体 3mL×1 瓶，4℃保存；

产品说明：
线粒体复合体Ⅲ（EC 1.10.2.2）又称 CoQ-细胞色素 C 还原酶，广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中，是线粒体呼吸电子传递链主路和支路的共有成分，负责把还原型 CoQ 的氢传递给细胞色素 C，生成还原型细胞色素 C。与氧化型细胞色素 C 不同，还原型细胞色素 C 在 550nm 有特征光吸收，因此 550nm 光吸收增加速率能够反映线粒体复合体Ⅲ酶活性。

试验中所需的仪器和试剂：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：
一、复合体Ⅲ的提取：
① 称取约0.1g组织或收集500万细胞，加入1.0 mL提取液，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 4 ℃ 600 g离心10min。
③ 将上清液移另一离心管中，4 ℃ 11000 g离心15min。
④ 上清液即胞浆提取物，可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅲ（此步可选做，可以判断线粒体提取效果）。
⑤ 在沉淀中加入200uL提取液，超声波破碎（功率20％，超声5秒，间隔10秒，重复15次），用于复合体Ⅲ酶活性测定，并且用于蛋白含量测定。

二、测定步骤：
1. 可见分光光度计预热30min 以上，调节波长550nm，蒸馏水调零。
2. 工作液的配制：临用前把试剂二转移到试剂一中混合溶解，用不完的试剂4℃可保存一周；

相关文献：

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