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当前位置:首页产品中心生化指标检测试剂盒BC0430ADPG焦磷酸化酶(AGP)活性检测试剂盒
ADPG焦磷酸化酶(AGP)活性检测试剂盒

产品简介

ADPG焦磷酸化酶(AGP)活性检测试剂盒
测定意义:AGP催化葡萄糖-1-磷酸与ATP反应生成淀粉合成的直接前体ADPG,是植物淀粉生物合成的主要限速步骤。
测定原理:AGP催化的逆向反应生成G1P,在反应体系中添加的磷酸己糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH,340nm下测定NADPH增加速率,即可计算AGP活性。

产品型号:BC0430
更新时间:2025-07-12
厂商性质:生产厂家
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ADPG焦磷酸化酶(AGP)活性检测试剂盒

操作步骤:

1,分光光度计预热 30min,调节波长到 340nm,蒸馏水调零。并将试剂一置 30℃保温 10min 以上。

2,在离心管中按顺序加入以下试剂:测定管试剂一(μL) 100 试剂二(μL) 10 试剂三(μL) 50 试剂四(μL) 100 样本(μL) 20 混匀,30℃保温 15 min,置沸水浴中 1 min,冰浴迅速冷却试剂一(μL) 300 试剂五(μL) 100 试剂六(μL) 10 试剂七(μL) 10 混匀后立即在 340 nm 波长下记录初始吸光度 A1 和 2min 后的吸光度 A2,计算ΔA=A2-A1。

ADPG焦磷酸化酶(AGP)活性检测试剂盒

AGP 活性计算:

1、按样本蛋白浓度计算:单位的定义:每 mg 组织蛋白在反应体系中每分钟催化产生 1nmol NADPH 定义为一个酶活性单位。 AGP(U/mg prot)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×10 9] ÷(V 样×Cpr)÷T=2813×ΔA÷Cpr。此法需要自行测定粗酶液蛋白质浓度。

2、按照样本鲜重计算单位的定义:每 g 组织在反应体系中每分钟催化产生 1nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。 AGP 活性(U/g mass)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×10 9] ÷(W×V 样÷V 样总)÷T=2813×ΔA÷W

V 反总:反应体系总体积,7×10 -4 L;ε:NADPH 摩尔消光系数,6.22×10 3mol/L/cm;V 样:加入样本体积,0.02 mL;

V 样总:加入提取液体积,1 mL;d:比色皿光径 1cm。Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL。W:样品质量,g。T:反应时间 2min。

ADPG焦磷酸化酶(AGP)活性检测试剂盒

提取液:液体 30mL×1 瓶,4℃保存; 试剂一:液体 10mL×1 瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1 支,4℃保存;临用前每支加入 250μL 双蒸水充分溶解备用;用不完的试剂仍 4℃保存;试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 2mL 双蒸水充分溶解备用;用不完的试剂仍 4℃保存;试剂四:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用每瓶前加入 3mL 双蒸水充分溶解备用;用不完的试剂仍 4℃保存;试剂五:粉剂×1 瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入 3mL 双蒸水充分溶解备用;用不完的试剂仍-20℃保存;试剂六:粉剂×1 支,-20℃保存;临用前每支加入 250μL 双蒸水充分溶解备用;用不完的试剂 4℃保存;试剂七:粉剂×1 支,-20℃保存;临用前每支加入 250μL 双蒸水充分溶解备用;用不完的试剂 4℃保存;

 

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