一文讲透蛋白裂解液：以北京索莱宝 R0010／R0020／R0030为例

更新时间：2026-10-21

点击次数：12

裂解液的核心作用是破坏细胞膜、细胞器膜乃至核膜，把胞内蛋白释放到溶液中，同时尽量维持蛋白的天然状态或便于后续变性电泳。其主要成分为表面活性剂（去污剂），常见如NP-40、TritonX-100、脱氧胆酸钠、SDS等，配合盐离子、缓冲体系与螯合剂，构成不同裂解强度的配方：

温和非离子型去污剂（如NP-40、TritonX-100）：主要裂解细胞膜，释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白，对蛋白天然构象破坏小，适合免疫共沉淀等功能性实验。

离子型/强去污剂（如SDS、脱氧胆酸钠）：可裂解核膜，将核蛋白、骨架蛋白和与膜紧密结合的蛋白一并释放，裂解力更强，但蛋白会发生变性。

RIPA裂解液正是兼含非离子与离子型去污剂的代表性配方，能同时提取胞浆、膜和核蛋白，是WB样品制备的"万金油"。

索莱宝裂解液主要产品系列

索莱宝商城"裂解液"品类下产品丰富，主力型号如下：

高效RIPA裂解液（组织/细胞），货号R0010：在普通RIPA基础上强化了去污剂配比与裂解效率，对难裂解组织、核蛋白及膜蛋白的提取效率更高，配套文献引用量高，是索莱宝裂解液中的明星产品。

普通RIPA裂解液（组织/细胞），货号R0020：经典RIPA配方，用于裂解细胞膜与核膜，提取可溶性总蛋白，适用于贴壁细胞、悬浮细胞及组织样本的常规总蛋白提取，是WB实验常用的基础型号。

非变性组织/细胞裂解液（NativeLysisBuffer），货号R0030：内含非离子型去垢剂，在非变性条件下裂解释放胞浆蛋白、可溶性膜蛋白和核蛋白，最大限度保留蛋白的天然特性与生物学功能（如抗原—抗体结合能力、酶学活性），因此尤其适宜免疫共沉淀、酶活分析，以及对非变性构象敏感、只能识别天然抗原位点的抗体实验。

全蛋白提取试剂盒（强）／（中），货号BC3710／BC3711：按裂解力分为"强""中"两档，针对难溶、高丰度膜结合或需要分级提取蛋白的场景，提供更系统化的试剂盒方案。

细菌蛋白提取试剂盒，货号BC3750：针对细菌细胞壁结构专门设计，弥补通用RIPA对原核样品裂解力不足的问题。

配套抑制与定量试剂：包括蛋白酶抑制剂混合液（100×PIC，P6730）、蛋白磷酸酶抑制剂混合物（All-in-one，100x，P1260）、用于BCA/Lowry法定量的福林酚（F8060／F8010）等，构成完整的裂解—保护—定量工作流。

规格上，裂解液常见100ml、500ml等包装，大包装可联系客服获取批量折扣，运输多为冷藏条件。

使用方法（以RIPA系列为例）

索莱宝裂解液通常随附PMSF（100mM），需现用现加：按每1ml裂解液加入10μlPMSF，使终浓度达到1mM，混匀备用。

样品前处理

贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗涤一遍，按6孔板每孔150–250μl的比例加入裂解液，用枪吹打数下使裂解液与细胞充分接触，冰上裂解5–10分钟。

悬浮细胞：离心收集细胞，弹散后按相同比例加入裂解液，冰上放置5–10分钟，期间轻弹管壁助裂解；细胞量过多时需分装为50–100万细胞/管再裂解。

组织样品：将组织剪成细小碎片，按每20mg组织加入150–250μl裂解液的比例加样，用玻璃匀浆器匀浆至充分裂解。裂解不充分可酌情补加裂解液，需要高浓度样品则减少裂解液用量。

后处理：裂解后10000–14000g离心3–5分钟，取上清，即可进行蛋白浓度测定、SDS-PAGE、WesternBlotting或免疫沉淀等操作。充分裂解的标志是无明显细胞沉淀。

非变性裂解液（R0030）操作流程与上述类似，但全程需保持温和条件，避免煮沸变性，以保留蛋白天然活性。

注意事项与避坑要点

沉淀处理：RIPA若在低温下出现沉淀，可放置室温半小时或常温水浴使沉淀溶解后再用。

粘度问题：RIPA类裂解液裂解细胞核时会释放基因组DNA，导致裂解液黏稠。此时可直接加入蛋白上样缓冲液煮沸再离心，离心后直接上样电泳；若需测浓度，可加入少量SDS（约1%）煮沸后离心再测。对与基因组结合特别紧密的蛋白，可通过超声打碎黏稠物后离心取上清。

蛋白定量方法选择：因裂解液含去污剂，会干扰Bradford法，故不适用Bradford试剂盒，应选择BCA法或Lowry法（可搭配索莱宝福林酚等试剂）。

抑制剂现用现加：PMSF、蛋白酶/磷酸酶抑制剂均建议临用前添加，保证蛋白磷酸化修饰与完整性。

储存条件：裂解液一般2–8℃保存，配套的PMSF需-20℃保存，保质期约1年；非变性裂解液同样遵循PMSF-20℃、其它试剂2–8℃的原则。