志贺氏菌增菌肉汤是一种专用于食品、饲料、水样及粪便等样品中志贺氏菌选择性增菌培养的液体培养基,是食品安全检测和临床微生物检验中的核心增菌培养基之一。
志贺氏菌增菌肉汤的操作流程:
1、干粉配制:称取31.5g干粉培养基,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,按实验需求分装至三角瓶。
2、灭菌处理:121℃高压灭菌15分钟,取出后冷却至45~55℃。
3、试剂添加:每225ml冷却后的肉汤中,加入1支配套的无菌新生霉素溶液,充分混匀。
4、接种培养:接入待检样本后,置于41.5℃±0.5℃厌氧环境中,培养16~20小时即可完成志贺氏菌的选择性增菌富集。
使用注意事项:
新生霉素必须后加:新生霉素不耐高温,必须在培养基高压灭菌并冷却至50-55℃后无菌添加,否则会被高温破坏而失效。
厌氧培养:志贺氏菌增菌肉汤要求厌氧条件培养,需使用厌氧培养装置或厌氧产气袋,否则增菌效果会下降。
培养温度准确控制:41.5℃是该培养基的关键参数,温度过高会抑制志贺氏菌生长,温度过低则选择性下降、杂菌增多。
培养时间把控:16-20小时为佳的窗口期,培养时间过长可能导致杂菌过度生长,影响后续分离效果。