技术文章_第(81)页－北京索莱宝科技有限公司

细胞自噬染色检测试剂盒的使用方法
2018-06-29 细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法)使用说明产品说明：自噬(autophagy)是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器，终将吞食物在溶酶体内降解的过程，自噬体(autophagosome)为双层膜包被的圆形或椭圆形结构，内含细胞质、长寿蛋白质和异常蛋白聚集物，损伤或多余细胞器如线粒体、粗面内质网和微体、病毒和细菌等。单丹磺酰尸胺(Dansylcadaverine,MDC)是一种荧光色素，是嗜酸性染色剂，通常被用于检测自噬体形成的特异性标记染色剂，其检测激发滤光片波长355nm...
ECL Plus超敏发光液使用方法
2018-06-29 ECLPlus超敏发光液使用方法：1、常规电泳、转膜、HRP标记抗体或核酸探针孵育、洗膜。注意用HRP标记IgG或用一抗-链亲和素-生物素-HRP夹心法。核酸杂交膜用HRP标记探针杂交，洗膜。2、在洗涤膜上的HRP标记二抗的同时，新鲜配制发光工作液：分别取等体积的溶液A和B混合，放置使之恢复室温否则会减弱荧光强度。建议立即使用工作液，室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有减低。3、用镊子取出膜，搭在滤纸上沥干洗液但勿使膜*干燥。将膜*浸入并与发光工作液充分接触（约0.125ml...
线粒体膜电位检测试剂盒的作用说明
2018-06-19 产品作用1、线粒体膜电位检测试剂盒是一种以JC-1为荧光探针，快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒，线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。2、通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同时也可以用JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。3、JC-1是一种检测线粒体膜电位的理想荧光探针。在线粒体膜电位较高时，JC-1聚集在线粒体的基质(matrix)中，形成聚合物，产生红色荧光；4、在线粒...
神奇滤布的作用说明
2018-06-04 基因工程转化真菌和一些土壤细菌时，往往需要先消化掉厚厚的细胞壁，制备分离原生质体以便进行转化，即使是大家很熟悉的酵母转化，当简便的醋酸锂方法不起作用时，原始也是有效方法还是原生质体转化。当经过消化处理的菌体混合液经过Miracloth过滤后，就可以去掉未被消化*的菌体和杂质，分离得到的“裸露的”原生质体就可以准备进行转化或者电转了。如果没有这一步的分离，未*消化的菌体由于生长迅速，会严重干扰结果。植物基因组纯化相对比较麻烦一点，市面上有不少试剂盒可供选择，多数纯化基因组DNA...
活性氧检测试剂盒试剂准备说明
2018-05-17 活性氧检测试剂盒试剂准备说明试剂准备：1.DCFH-DA可稀释于培养基或缓冲液中。血清或培养基颜色并不影响DCFH-DA及细胞内荧光产生，但可能会影响荧光显微镜观察，干扰荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪荧光测定。可将DCFH-DA稀释于无酚红培养基或适宜的缓冲液如PBS中。这依赖于使用何种荧光设备进行测定。2.加入DCFH-DA的时机或孵育时间，以终能顺利检测细胞内活性氧为目的。药物处理时间较短(6小时)或预计产生ROS效应较强，可后加DCFH-DA。3.活性氧供体含高...
胰蛋白酶消化液的配制及注意事项
2018-05-04 胰蛋白酶消化液的配制及注意事项胰蛋白酶消化液的配制（1）在D-Hanks液高压灭菌之后，晾室温，4℃保存备用。（2）称取一定量胰蛋白酶粉末于研磨器中（夏天时研磨器应放在冰浴中），加入少量D-Hanks液碾磨100~1000次，调制成糊状。再放入4℃预冷的适量D-Hanks液中，4℃下磁力搅拌使*溶解（一般4~12h）。（3）用NaHCO3干粉将胰酶溶液的pH调8.0左右（胰酶作用的适pH为8.2）。（4）过滤除菌（方法见前篇培养基的配制），—20℃保存。注意事项：1．由于组织...
如何选择合适的透析袋
2018-04-27 正确选择合适的截留分子量截留分子量的选择是以预留在膜内的大分子的分子量和将要被除去的小分子污染物的分子量为基础的。为达到合理有效的分离，需分离的两种物质分子量的比率少为25.选择截留分子量的经验法则：选择截留分子量值约为要保留的大分子分子量的一半，以获得少90%的保留率。正确选择扁平宽度透析袋扁平宽度的选择取决于样品体积和透析容量。较小的透析管透析更快；较大的透析管因扩散距离较长透析较慢。为易于使用，建议使用总长（包括闭合夹和顶部空间）为大约10-15厘米的透析袋透析袋的化学...
蛋白电泳 SDS-PAGE及Western blot
2018-04-13 蛋白电泳SDS-PAGE原理SDS是一种阴离子表面活性剂，能打断蛋白质的氢键和疏水键，并按一定的比例和蛋白质分子结合成复合物，使蛋白质带负电荷的量远远超过其本身原有的电荷，掩盖了各种蛋白分子间天然的电荷差异。因此，各种蛋白质-SDS复合物在电泳时的迁移率，不再受原有电荷和分子形状的影响，而只是棒长的函数。这种电泳方法称为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（简称SDS—PAGE）。实验使用过程中，还加入DTT或者巯基乙醇，以打开蛋白间的二硫键，破坏蛋白质的四级结构。SDS—PAGE常采...

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