荧光蛋白上样缓冲液 Band-Now(SDS-PAGE)含DTT,立显蛋白电泳条带显色剂是一种在SDS-PAGE凝胶电泳中使用的立显蛋白电泳条带显色剂。可以在对蛋白样品做变性处理的同时对蛋白进行预显色。 荧光蛋白上样缓冲液
产品分类
荧光蛋白上样缓冲液在电泳前的样品处理阶段对SDS-PAGE的蛋白样品进行预染,标记上荧光。实验完成以后,凝胶中或转膜后的蛋白条可直接通过紫外灯、LED灯或其他数字成像系统进行观察和分析,无需染色脱色。
荧光蛋白上样缓冲液灵敏度高比银染高。稳定性强,背景低。可对所有蛋白进行染色,不影响蛋白的迁移率与电泳图谱。电泳过程中,游离的染料分子与溴酚蓝的迁移速率一致,跑胶结束时 移至凝胶末端,背景干净。荧光蛋白上样缓冲液非常适合用于追踪蛋白表达纯化以及Western blot的SDS-PAGE。
使用步骤
1. 请在使用前根据管壁标签上的体积加入resuspension buffer重悬。Resuspension buffer在4℃可能会有沉淀产生,室温下放置至沉淀消失。
2. 将用上样缓冲液处理的蛋白样品与待电泳蛋白样品1:2混合。比如,3ul 上样缓冲液 + 6ul 蛋白样品。
3. 90-100℃加热上述处理的样品混合液5分钟。细胞或组织样品,加热时间延长至10分钟。确保加热温度>90℃使样品充分受热。
? 大部分预制胶(Bis-Tris体系除外)可以直接进行下一步。Bis-Tris体系的预制胶(如Life Technology),需加入20%已处理样品体积的Enhancing buffer。比如,10ul已处理的样品需加入2ul Enhancing buffer。
4. 样品可以上样进行电泳了(无需再加Loading Buffer处理)。
5. 电泳结束后,将凝胶放至透射仪上进行观察和拍照。透射仪可以是紫外灯,蓝光LED灯或其它凝胶成像系统。如果光源在可见光波长范畴的无需剥胶,因为可见波长范围内的光可以穿透玻璃或塑料材质的胶板。
6. (可选的)如果有需要,经荧光蛋白上样缓冲液处理的凝胶仍可进行考染。按标准的考染步骤进行即可。
注意事项:
1. 请勿使用该上样缓冲液处理预染的或预处理的蛋白分子量标准。这些产品与荧光蛋白上样缓冲液不兼容。
2. 灵敏度影响因素:高pH(大于7)不会影响染色,低pH则会降低染色的效率,如果样品的pH低于5,建议将pH调整至7以上。
3. 荧光蛋白上样缓冲液不适合在如下SDS-PAGE实验中使用:切割蛋白条带用以测序、质谱分析或抗体制备。
4. 建议-20保存,如果室温放置2-3周,则可添加新的DTT,蛋白条带会重新变得清晰和明亮。添加DTT的终浓度不要超过20 mM。也可以添加其他还原剂TCEP(2 mM), 效果也很好。
规格:每个规格包含3管:Instant-Bands, Resuspension Buffer 和Enhancing buffer。只有使用Bis-tris 胶时才需要加Enhancing Buffer.
【本资料源自公开渠道,如需(此处)屏蔽,请联系删除】
标题:CRISPR-mediated WNK4 point mutation aggravates tumor progression and weakens chemotherapy sensitivity in gastric cancer
成员:Xiaojun Ying, Zhen Ying, Xiaobing Gao, Yong Wang, Xinting Lv
论文因子:2.5 发表期刊:HISTOLOGY AND HISTOPATHOLOGY pmid:39363579
【本资料源自公开渠道,如需(此处)屏蔽,请联系删除】
标题:Exploring the Role of Neutrophil-Related Genes in Osteosarcoma via an Integrative Analysis of Single-Cell and Bulk Transcriptome
成员:Jing Lu, Jiang Rui, Xiao-Yu Xu, Jun-Kang Shen
论文因子:3.9 发表期刊:Biomedicines pmid:39062086
【本资料源自公开渠道,如需(此处)屏蔽,请联系删除】
标题:PRG4 represses the genesis and metastasis of osteosarcoma by inhibiting PDL1 expression
成员:Lei Zhang, Hongwei Ren, Yanjuan Wu, Lili Xue, Yang Bai, Dong Wei, Qilong Wu
论文因子:2.6 发表期刊:TISSUE & CELL pmid:38781792
【本资料源自公开渠道,如需(此处)屏蔽,请联系删除】
标题:METTL14 affects UVB-induced human dermal fibroblasts photoaging via miR-100-3p biogenesis in an m6A-dependent manner
成员:Lihao Chen, Yu Hu, Min Zhang, Lihao Liu, Jing Ma, Zhuohong Xu, Jiaan Zhang, Heng Gu, Kun Chen
论文因子:7.8 发表期刊:AGING CELL pmid:38380598
【本资料源自公开渠道,如需(此处)屏蔽,请联系删除】
标题:IGF2BP2-m6A-circMMP9 axis recruits ETS1 to promote TRIM59 transcription in laryngeal squamous cell carcinoma
成员:Li Jinling, Cao Huan, Yang Jianwang, Wang Baoshan
论文因子:4.6 发表期刊:Scientific Reports pmid:38321126
注意:以上文献 仅供参考
荧光蛋白上样缓冲液
荧光蛋白上样缓冲液