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产品名称:Human IL-5 elisa

产品型号:SEKH-0012 96T

产品报价:

产品特点:人白细胞介素5 Human IL-5 elisa定量检测
索莱宝ELISA试剂盒的优势:
1,包被的酶标板单板可拆(能拆分成12个8孔的酶标条)
2,提供免费代测代检服务,代出实验数据
3,发文章高奖励
4,磁铁可吸附式包装盒,包装精美耐用

免费咨询:010-50973130

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SEKH-0012 96THuman IL-5 elisa的详细资料:

人白细胞介素5  Human IL-5 elisa

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SEKH-0261Human MSP80 pg/ml156 - 10,000 pg/ml
SEKH-0262Human Myeloperoxidase30 pg/ml62.5  -  4,000 pg/ml
SEKH-0263Human NAP-27 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
SEKH-0264Human Neprilysin60 pg/ml125 - 8,000 pg/ml
SEKH-0265Human Neuroserpin30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
SEKH-0266Human Neuropilin-2/NRP280 pg/ml156 - 10,000 pg/ml
SEKH-0267Human NGAL/Lipocalin-215 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
SEKH-0268Human beta-NGF4 pg/ml7.8 - 500 pg/ml
SEKH-0269Human NGF R30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
SEKH-0270Human Nidogen-1/Entactin30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
SEKH-0271Human Notch-140 pg/ml78.1 - 5,000 pg/ml
SEKH-0272Human NOV/CCN3 15 pg/ml31.2 - 2,000pg/ml
SEKH-0273Human NT-315 pg/ml31.2 - 2000pg/ml
SEKH-0274Human NT-415 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
SEKH-0275Human Oncostatin M 15 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
SEKH-0276Human OPG30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
SEKH-0277Human OSM-R80 pg/ml312  -  20,000 pg/ml
SEKH-0278Human Osteepontin (OPN)30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
SEKH-0279Human Osteoactivin/GPNMB60 pg/ml125 - 8,000 pg/ml
SEKH-0281Human Osteoprotegerin/TNFRSF11B  30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
SEKH-0282Human PAI-1/Serpin E123 pg/ml46.8 - 3,000 pg/ml
SEKH-0283Human PARC/CCL184 pg/ml7.8 - 500 pg/ml
SEKH-0284Human PBEF/Visfatin0.25 ng/ml0.5 - 32 ng/ml
SEKH-0285Human P-Cadherin30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
SEKH-0286Human PD-180 pg/ml156 - 10,000 pg/ml
SEKH-0287Human PDGFRB/CD140b30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
SEKH-0288Human PDGFRA/CD140a15 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
SEKH-0289Human PDGF-AA7 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
SEKH-0290Human PDGF-BB30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
SEKH-0291Human  PDGF-AB7 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
SEKH-0292Human PECAM-170 pg/ml156 - 10,000 pg/ml
SEKH-0293Human Pentraxin 3/TSG-14110 pg/ml218 - 14,000 pg/ml
SEKH-0294Human Periostin/OSF-230 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
SEKH-0295Human Perforin15pg/ml31.2 - 2,000pg/ml
SEKH-0296Human PLGF 15 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
SEKH-0297Human PRLR4 pg/ml7.8 - 500 pg/ml
SEKH-0298Human  prolactin(PRL)7 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
SEKH-0299Human pro-BDNF40 pg/ml78.1 - 5,000 pg/ml
SEKH-0300Human Proprotein Convertase 9/PCSK960 pg/ml125 - 8,000 pg/ml
SEKH-0301Human P-selectin30 pg/ml125  -  8,000 pg/ml
SEKH-0302Human RAGE30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
SEKH-0303Human RBP411 pg/ml23.4 - 1,500 pg/ml
SEKH-0304Human Relaxin-24 pg/ml7.8 - 500 pg/ml
SEKH-0305Human RELM-beta4 pg/ml7.8 - 500 pg/ml
SEKH-0306Human Resistin8 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
SEKH-0308Human sCD40L7 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
SEKH-0309Human sCD1638 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
SEKH-0310Human SDF-160 pg/ml125 - 8,000 pg/ml
SEKH-0311Human sE-selectin/CD62E46 pg/ml93.8 - 6,000 pg/ml
SEKH-0312Human SP-D80 pg/ml156 - 10,000 pg/ml
SEKH-0313Human sTNF RI/TNFRSF1A6 pg/ml12.5 - 800 pg/ml
SEKH-0314Human sTNF RII/TNFRSF1B4 pg/ml7.8 - 500 pg/ml
SEKH-0315Human TARC/CCL174 pg/ml7.8 - 500 pg/ml
SEKH-0316Human TGF-beta 115 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
SEKH-0317Human TGF-beta-215 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
SEKH-0318Human TGF-beta 315 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
SEKH-0319Human Tie180 pg/ml156 - 10,000 pg/ml
SEKH-0320HumanTIM-1/KIM-1/HAVCR7 pg/ml15.6  -  1,000 pg/ml
SEKH-0321Human Thioredoxin-1/Trx130 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
SEKH-0322Human Thrombospondin-1/THBS-10.8 ng/ml1.56 - 100 ng/ml
SEKH-0323Human TIMP-115 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
SEKH-0324Human TIMP-215 pg/ml31.2  -  2,000 pg/ml
SEKH-0325Human TIMP-430 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
SEKH-0326Human TL-1A15 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
SEKH-0327Human TRAIL/TNFSF1011 pg/ml23.4 - 1,500 pg/ml
SEKH-0328Human TRANCE/TNFSF11/RANKL15 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
SEKH-0329Human Transferrin/TF7 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
SEKH-0330Human Transferrin Receptor/TFR40 pg/ml78.1 - 5,000 pg/ml
SEKH-0331Human TREM223 pg/ml46.9 - 3,000 pg/ml
SEKH-0332Human TrkA/NTRK180 pg/ml156 - 10,000 pg/ml
SEKH-0333Human TrkB/NTRK23pg/ml6.25 - 400 pg/ml
SEKH-0334Human TSLP15 pg/ml31.2  -  2000 pg/ml
SEKH-0335Human TWEAK15 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
SEKH-0336Human UPAR 15 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
SEKH-0337Human u-Plasminogen Activator/Urokinase30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
SEKH-0338Human VEGF R1/Flt-160 pg/ml125 - 8,000 pg/ml
SEKH-0339Human VEGF R2/KDR15 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
SEKH-0340Human VEGF R3/Flt-480 pg/ml156 - 10,000 pg/ml
SEKH-0341Human Vitamin D BP80 pg/ml156 - 10,000 pg/ml
SEKH-0342Human Vitronectin/VTN15 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
SEKH-0343Human von Willebrand Factor150 pg/ml312 - 20,000 pg/ml
SEKH-0344Human XPNPEP25 pg/ml10.9 - 700 pg/ml
SEKH-0345Human 2B4 / CD24460 pg/ml125 - 8,000 pg/ml
SEKH-0346Human ACBD623 pg/ml46.8 - 3,000 pg/ml
SEKH-0347Human ACRV123 pg/ml46.8 - 3,000 pg/ml
SEKH-0348Human ADAM1523 pg/ml46.8 - 3,000 pg/ml
SEKH-0349Human ALK-1 / ACVRL17 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
SEKH-0350Human alpha-Galactosidase A / GLA40 pg/ml78.1 - 5,000 pg/ml
SEKH-0351Human Apolipoprotein H / APOH20 pg/ml39 - 2500 pg/ml
SEKH-0352Human ASGPR1 / ASGR120 pg/ml39 - 2500 pg/ml
SEKH-0353Human B4GALT1 / GGTB278 pg/ml156 - 1,0000 pg/ml
SEKH-0354Human BAMBI / NMA9 pg/ml18.7 - 1200 pg/ml
SEKH-0355Human CD112 / Nectin-2 / PVRL27 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
SEKH-0356Human  EMMPRIN/CD147 3 pg/ml6.25 - 400 pg/ml
SEKH-0357Human SLAMF1 / SLAM / CD1504 pg/ml7.8 - 500 pg/ml
SEKH-0358Human CD157 / BST123 pg/ml46.8 - 3,000 pg/ml
SEKH-0359Human CD160 /BY5546 pg/ml93 - 6,000 pg/ml
SEKH-0360Human CD171 / N-CAML1 / L1CAM23 pg/ml46.8 - 3,000 pg/ml
SEKH-0361Human CD8A / MAL40 pg/ml78.1 - 5,000 pg/ml
SEKH-0362Human Cystatin 7 / CST7117 pg/ml234 - 15,000 pg/ml
SEKH-0363Human Cystatin E / CST64 pg/ml7.81 - 500 pg/ml
SEKH-0364Human Cystatin S / CST44 pg/ml7.81 - 500 pg/ml
SEKH-0365Human Cystatin SA / CST22 pg/ml4.7 - 300 pg/ml
SEKH-0366Human Cystatin SN / CST130 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
SEKH-0367Human ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG60 pg/ml125 - 8,000 pg/ml
SEKH-0368Human JAML / AMICA117 pg/ml234 - 15,000 pg/ml
SEKH-0369Human Junctional Adhesion Molecule A / JAM-A7 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
SEKH-0370Human KIT / c-KIT / CD11711 pg/ml23.4 - 1500 pg/ml
SEKH-0371Human KLK11 / Kallikrein-1123 pg/ml46.8 - 3,000 pg/ml
SEKH-0372Human KLK13 / Kallikrein 1320 pg/ml39 - 2500 pg/ml
SEKH-0373Human KLK3 / Kallikrein 330 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
SEKH-0374Human LGALS32 pg/ml3.9 - 250 pg/ml
SEKH-0375Human LOXL278 pg/ml156 - 1,0000 pg/ml
SEKH-0376Human P4HB46 pg/ml93.8 - 6,000 pg/ml
SEKH-0377Human PDK / PDZ binding kinase / TOPK30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
SEKH-0378Human PHPT17 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
SEKH-0379Human PIGR30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
SEKH-0380Human PNLIP7 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
SEKH-0381Human PTH / PTH1 / Parathyroid Hormone312 pg/ml625 - 4,0000 pg/ml
SEKH-0382Human PTX3 / Pentraxin 3 / TSG-1412 pg/ml24 - 1500 pg/ml
SEKH-0383Human REG1B2 pg/ml3.9 - 250 pg/ml
SEKH-0384Human REG42 pg/ml3.9 - 250 pg/ml
SEKH-0385Human RNase A / Ribonuclease A / RNASE160 pg/ml125 - 8,000 pg/ml
SEKH-0386Human SAA4 20 pg/ml39.06 - 2500 pg/ml
SEKH-0387Human SCGN / Secretagogin 4 pg/ml7.8 - 500 pg/ml
SEKH-0388Human SIGLEC5117 pg/ml234 - 15,000 pg/ml
SEKH-0389Human STK4 / MST146 pg/ml93.8 - 6,000 pg/ml
SEKH-0390Human SULT1E115 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
SEKH-0391Human Tetranectin / CLEC3B55 pg/ml109 - 7,000 pg/ml
SEKH-0392Human TFPI23 pg/ml

46.8 - 3,000 pg/ml

 

人白细胞介素5  人白细胞介素5 

人白细胞介素5ELISA 试剂盒
产品编号:SEKH-0012
适用于人血清、血浆或细胞培养上清液等样本

Human IL-5 elisa

 


 

 

 

背景介绍:
      人IL-5由抗原活化的 CD4+T 细胞产生,在小鼠则由Th2亚群细胞产生。天然IL-5的分子量为40~50KD, 是由二硫键连接的二聚体糖蛋白,但是单体 IL-5 也有 IL-5 活性。人的 IL-5 由 134 氨基酸残基组成,含 22 氨基酸残基信号肽,2 个糖基化点,人和小鼠 IL-5 基因分别定位于第 5 号和第 11 号染色体,人和鼠 IL-5 在 氨基酸水平上有 70%的同源性,人和鼠 IL-5Rα链有 79%的同源性。IL-5 主要有促进 B 细胞分化与生长;诱 导嗜酸性粒细胞分化;促进 IgA 合成;诱导细胞毒 T 细胞(CTL)的生成以及刺激嗜酸性粒细胞增殖、分化及活 化等作用。

 

检测原理:
     Solarbio  ELISA 试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。将抗人 IL-5 单克 隆抗体包被在酶标板上;分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本,标准品和样本中的人 IL-5 会与酶标 板上的包被抗体充分结合;洗板后加入生物素化抗人 IL-5 抗体,该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品 和样本中的人 IL-5 发生特异性结合;洗板后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素,生物素与链 霉亲和素会发生高强度的非共价结合;洗板后加入显色剂底物 TMB,若反应孔中样品存在不同浓度的人 IL-5, 则 HRP 会使无色 TMB 变成不同深浅(正相关)的蓝色物质,加入终止液后反应孔会变成黄色;后,在 λmax=450 nm(OD=450 nm)处测定反应孔样品吸光度(OD),样本中的人 IL-5 浓度与 OD 成正比,通过 绘制标准曲线和四参数拟合软件便可计算出样本中人 IL-5 的浓度。

 

原理图:

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注意事项:
1. 试剂盒应在有效期内使用,请不要使用过期的试剂。
2. 试剂盒未使用时应保存在 2-8℃冰箱,已复溶但未用完的标准品,请丢弃。
3. 试剂盒使用前请在室温恢复 30 min,且充分混匀试剂盒里的各种成份及制备的样品。
4. 在试验中标准品和样本建议作复孔检测,且加入试剂的顺序应保持*。
5. 为避免交叉污染,请在试验中使用 1 次性试管,枪头,封板膜(※)及洁净塑料容器。

6. 浓缩生物素化抗体和浓缩酶结合物的体积较少,在运输过程中微量液体会沾到管壁及瓶盖上,使用前请离心处理(5-10 S 即可),使管壁上的液体集中在管底部,取用时,请用移液器小心吹打几次。
7. 除了试剂盒中的浓缩洗涤液和终止液可以通用外,请不要使用其他来源试剂盒内含的试剂代替本试剂盒中的某单个组分。
8. 为保证结果准确,每次检测均需做标准曲线。

 

安全提示:
试剂盒中的终止液为酸性溶液,操作人员在使用时请带上手套并注意防护;在操作过程中也要避免试
剂接触皮肤和眼睛,如果不慎接触,请用大量清水清洗;检测血液样本及其它体液样本时,请按国家生物
实验室安全防护有关管理规定执行。

 

 

自备实验器材(不提供,可代购)
1. 酶标仪(主波长 450nm,参考波长 630nm)
2. 高精度移液器及一次性吸头:0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl
3. 洗板机或洗瓶
4. 37℃孵育箱
5. 双蒸水,去离子水,量筒等
6. 稀释用聚丙烯试管

 


样本收集及储存:
1. 细胞培养上清:
将细胞培养基移无菌离心管,在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
2. 血清样本:
室温血液自然凝固 20 min 后,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于
-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),保存过程中如有沉淀,请再次离心,避免反复冻融。
3. 血浆样本:
将全血收集到含抗血凝剂的管中,根据标本的实际要求选择 EDTA,柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合 20 min ,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
※注意:血清血浆样本避免使用溶血、高血脂样本,以免影响检测结果;如果样本中的靶标物检测浓度高
于标准品的值,请将样品做适当倍数稀释后检测,建议正式实验前做预实验以确定稀释倍数。

 

 

试剂准备:
1. 试剂回温:先在实验前 30 min 将试剂盒,待测样本放置于室温下,浓缩洗涤液如出现结晶,请放入
37℃温浴直到结晶全部溶解。
2. 配制洗涤液:预先计算好稀释后的洗涤液使用体积,然后用双蒸水或去离子水将 20 倍浓缩洗涤液稀释成 1 倍应用液,未用完的浓缩洗涤液放入 4℃冰箱保存。
3. 标准品梯度稀释:加入标准品/样本稀释液(SR1)1ml冻干标准品中,静置15分钟待其*溶解后轻 轻混匀(浓度为2000pg/ml),然后在其余七管中各加入500?1?78?1?76L标准品/样本稀释液(SR1),按照以下浓度 进行2倍稀释:300(标准品稀释液700ul+溶解好的标准品原液300ul)、150、75、37.5、18.75、9.375、 4.68、0 pg/ml进行稀释。300pg/ml为标准曲线点浓度,标准品/样本稀释液(SR1)作为标准曲线的 零点(0pg/ml)。复溶过的标准品原液(2000pg/ml)未用完的应废弃或根据需要按照一次用量分装,并 将其贮存在-20~-80℃冰箱,具体如下图。

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4. 生物素化抗体工作液:预先计算好试验所需用量,用检测稀释液(SR2)将100倍抗体浓缩液稀释成1倍

应用工作液(稀释前充分混匀),请在30分钟内加入到反应孔中。


5. 酶结合物工作液:按每次试验所需用量配制,用酶结合物稀释液(SR3)将100倍浓缩酶结合物稀释成1 倍应用工作液(稀释前离心),请在30分钟内使用。


6. 洗涤方法: 

自动洗板:甩尽酶标板孔中液体,在厚迭吸水纸上拍干,注入洗涤液为 300ul/孔,注 与吸出间隔为 30 秒,洗板 5 次。 

手工洗板:甩尽酶标板孔中液体,在厚迭吸水纸上拍干,用洗瓶加入洗涤液 300ul/孔,静止 30 秒后甩 净酶标板孔中液体,在厚迭的吸水纸上拍干,洗板 5 次。

 

结果判断:

1.用酶标仪 450 nm 波长测定 OD 值。选择双波长检测,参考波长为 630 nm。如不能进行双波长检测,请 用 450 nm 的 OD 测定值减去 630 nm 的 OD 测定值。

2.计算标准品、样品的平均 OD 值:每个标准品和标本的 OD 值应减去零孔的 OD 值

3.以标准品浓度为横坐标,吸光度OD值为纵坐标,用软件绘制标准曲线,样品中IL-5含量可通过对应OD 值由标准曲线换算出相应的浓度。

4.若标本 OD 值高于标准曲线上限,应做适当稀释后重新检测,计算浓度时再乘以稀释倍数。

 



 

1. 数据及标准曲线

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本图仅供参考,应以当次试验标准品绘制的标准曲线计算人 IL-5 的样本含量

 

2. 灵敏度:
低可检测人 IL-5 浓度达 2pg/ml,
20 个零标准品浓度 OD 的平均值加上两个标准差,计算相应的可检测浓度。


3. 特异性:
不与人 IL-3、IL-5 Rα、IL-5 Rβ反应,小鼠 IL-5 等反应。


4. 重复性:
板内,板间变异系数<10%。


5. 回收率:
在选取的健康人血浆、细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人 IL-5,计算回收率。

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6. 线性稀释:

分别在选取的 4 份健康人血浆和细胞培养上清中加入高浓度人 IL-5,在标准曲线动力学范围内进行稀 释,评估线性。





 

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