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产品名称:乙酰胆碱酯酶(AchE)测定试剂盒 微量法

产品型号:BC2025

产品报价:

产品特点:乙酰胆碱酯酶(AchE)测定试剂盒 微量法
品牌:Solarbio | 货号:BC2025
检测方法 : 微量法
规格:100管/96样

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BC2025乙酰胆碱酯酶(AchE)测定试剂盒 微量法的详细资料:

        乙酰胆碱酯酶(AchE)测定试剂盒 微量法

测定意义:AchE属于丝氨酸水解酶,广泛存在于各种动物组织和血清中。AchE催化乙酰胆碱(Ach)水解,在神经传导调节中起重要作用。

测定原理:AchE催化Ach水解生成胆碱,胆碱与二硫对硝基苯甲酸(DTNB)作用生成5-巯基-硝基苯甲酸(TNB);TNB在412nm处有吸收峰,通过测定412 nm吸光度增加速率,计算AchE活性。

需要的仪器,耗材:紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪和蒸馏水。

乙酰胆碱酯酶(AchE)测定试剂盒 微量法
微量法
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

货号:BC2025

规格:100 管/96 样

产品内容:

试剂一:液体×1 瓶,4℃保存。

试剂二:液体×1 瓶,4℃保存。

试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加入 1.3mL 试剂二,充分震荡溶解。

试剂四:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加入 1.3mL 试剂二,充分震荡溶解。

产品说明: AchE 属于丝氨酸水解酶,广泛存在于各种动物组织和血清中。AchE 催化乙酰胆碱(Ach)水 解,在神经传导调节中起重要作用。 AchE 催化 Ach 水解生成胆碱,胆碱与二硫对硝基苯甲酸(DTNB)作用生成 5-巯基-硝基苯甲 酸(TNB);TNB 在 412nm 处有吸收峰,通过测定 412nm 吸光度增加速率,计算 AchE 活性。 自备仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪和蒸 馏水。

操作步骤:

一、粗酶液提取:

1. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液)进行冰浴匀浆,8000g4℃离心 10min,取上清液待测。

2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万 细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min); 然后 8000g,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。

3. 血清等液体:直接测定。

二、测定操作:

1. 分光光度计预热 30min,调节波长到 412nm,蒸馏水调零。

2. 试剂二置于 37℃水浴中预热 30min。

3. 空白管:取微量石英比色皿/96 孔板,依次加入 20μL 蒸馏水、 160μL 试剂二、 10μL 试剂三和 10μL 试剂四,迅速混匀,于 412nm 处测定 3min 内吸光值变化,第 10s 吸光值记为 A1,第 190s 吸光 值记为 A2。△A 空白管=A2-A1 4. 测定管:取微量石英比色皿/96 孔板,依次加入 20μL 上清、160μL 试剂二、10μL 试剂三和 10μL 试剂四,迅速混匀,于 412nm 处测定 3min 内吸光值变化,第 10s 吸光值记为 A3,第 190s 吸光 值记为 A4。△A 空白管=A4-A3

注意:空白管只需测定一次

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