乙酰胆碱酯酶（AchE）测定试剂盒 微量法

测定意义：AchE属于丝氨酸水解酶，广泛存在于各种动物组织和血清中。AchE催化乙酰胆碱（Ach）水解，在神经传导调节中起重要作用。

测定原理：AchE催化Ach水解生成胆碱，胆碱与二硫对硝基苯甲酸（DTNB）作用生成5-巯基-硝基苯甲酸（TNB）；TNB在412nm处有吸收峰，通过测定412 nm吸光度增加速率，计算AchE活性。

需要的仪器，耗材：紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪和蒸馏水。

​乙酰胆碱酯酶（AchE）测定试剂盒 微量法
微量法
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

货号：BC2025

规格：100 管/96 样

产品内容：

试剂一：液体×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体×1 瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加入 1.3mL 试剂二，充分震荡溶解。

试剂四：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加入 1.3mL 试剂二，充分震荡溶解。

产品说明： AchE 属于丝氨酸水解酶，广泛存在于各种动物组织和血清中。AchE 催化乙酰胆碱（Ach）水 解，在神经传导调节中起重要作用。 AchE 催化 Ach 水解生成胆碱，胆碱与二硫对硝基苯甲酸（DTNB）作用生成 5-巯基-硝基苯甲 酸（TNB）；TNB 在 412nm 处有吸收峰，通过测定 412nm 吸光度增加速率，计算 AchE 活性。 自备仪器和用品： 可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪和蒸 馏水。

操作步骤：

一、粗酶液提取：

1. 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液）进行冰浴匀浆，8000g4℃离心 10min，取上清液待测。

2. 细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万 细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）； 然后 8000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。

3. 血清等液体：直接测定。

二、测定操作：

1. 分光光度计预热 30min，调节波长到 412nm，蒸馏水调零。

2. 试剂二置于 37℃水浴中预热 30min。

3. 空白管：取微量石英比色皿/96 孔板，依次加入 20μL 蒸馏水、 160μL 试剂二、 10μL 试剂三和 10μL 试剂四，迅速混匀，于 412nm 处测定 3min 内吸光值变化，第 10s 吸光值记为 A1，第 190s 吸光 值记为 A2。△A 空白管=A2－A1 4. 测定管：取微量石英比色皿/96 孔板，依次加入 20μL 上清、160μL 试剂二、10μL 试剂三和 10μL 试剂四，迅速混匀，于 412nm 处测定 3min 内吸光值变化，第 10s 吸光值记为 A3，第 190s 吸光 值记为 A4。△A 空白管=A4－A3

注意：空白管只需测定一次

相关文献：

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