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产品名称:糖原含量检测试剂盒

产品型号:BC0340

产品报价:

产品特点:糖原含量检测试剂盒
测定原理:蒽酮法。利用强碱性提取液提取糖原,在强酸性条件下利用蒽酮显色剂测定糖原含量。

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BC0340糖原含量检测试剂盒的详细资料:

 

产品名称: 糖原含量检测试剂盒

产品英文名: Glycogen Assay Kit

产品货号:BC0340     产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格:50管/48         产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存;            参考价格:190
库存状态:现货                          
关键字:   糖原检测试剂盒|糖原含量检测试剂盒|糖原|试剂盒

简要介绍:
糖原是由葡萄糖单位构成的高分子多糖,是糖的主要的储存形式之一,主要贮存在肝和肌肉中作为备用能量,分别称为肝糖原和肌糖原。肝糖原可调节血糖浓度,当血糖升高时可在肝脏合成糖原,血糖降低时,肝糖原则分解为葡萄糖以补充血糖。因此,肝糖原对维持血糖的相对平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的储存形式,在剧烈运动消耗大量血糖时,肌糖原不能直接分解成血糖,必须先分解产生乳酸,随血液循环到肝脏,通过糖异生转变为肝糖原或葡萄糖。

产品详细描述
产品内容:
提取液:液体50mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:0.1mg/mL 的葡萄糖标准液 10mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶, 4℃保存
产品说明
糖原是由葡萄糖单位构成的高分子多糖,是糖的主要的储存形式之一,主要贮存在肝和肌肉中作为备用能量,分别称为肝糖原和肌糖原。肝糖原可调节血糖浓度,当血糖升高时可在肝脏合成糖原,血糖降低时,肝糖原则分解为葡萄糖以补充血糖。因此,肝糖原对维持血糖的相对平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的储存形式,在剧烈运动消耗大量血糖时,肌糖原不能直接分解成血糖,必须先分解产生乳酸,随血液循环到肝脏,通过糖异生转变为肝糖原或葡萄糖。
测定原理:蒽酮法。利用强碱性提取液提取糖原,在强酸性条件下利用蒽酮显色剂测定糖原含量。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、浓硫酸(不允许快递)和蒸馏水。
操作步骤:

  • 糖原提取:

1﹑细胞或细菌:收集500~1000 万细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;加入0.75mL 提取液超声波破碎细菌或细胞(功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30 次);转移10mL 试管中,置于沸水浴中煮沸20min(盖紧,防止水分散失),隔5min 振摇试管1 次,使充分混匀;取出试管冷却后,用蒸馏水定容到5mL,混匀,待测。
2﹑组织:称取0.1~0.2g 样品,置于10mL试管中;加入0.75mL提取液,置于沸水浴中煮沸20min(盖紧,防止水分散失),隔5min 振摇试管1 次,使充分混匀;待组织全部溶解后,取出试管冷却后,用蒸馏水定容到5mL,混匀,待测。

  • 步骤和加样表
  • 分光光度计预热30min 以上,调节波长620nm,蒸馏水调零。
  • 调节水浴锅95℃。
  • 试剂二工作液的配置:在试剂二中倒入10mL 蒸馏水,缓慢倒入40mL 浓硫酸,充分溶解混匀后使用。用不完的的试剂4℃有效期一周。
  • 加样表(在EP 管中反应):

 

试剂空白管(μL标准管(μL测定管(μL
糖原提取液  250
试剂一 250 
蒸馏水250  
试剂二100010001000

混匀,置水浴10min(盖紧,防止水分散失),冷却,于620nm 波长处,分别读取空白管、标准管和测定管吸光度,分别记为A1A2 A3
注意:1、空白管和标准管只要测一次。
      2、如果A3-A1 大于2,需要将样本用蒸馏水稀释,计算公式中乘以相应的稀释倍数。

  • 糖原含量的计算:
  • 按照样本质量计算

糖原(mg/g 鲜重)=1.11×(C 标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)= 0.555×(A3-A1)÷A2-A1)÷W

  1. 按照蛋白质含量计算

糖原(mg/mg prot)=1.11×(C 标准×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)=0.111×(A3-A1) ÷A2-A1) ÷Cpr
3、按照细菌或细胞数量计算
糖原(mg/104 cell=1.11×(C 标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(细菌或细胞数量×V1÷V2)
                 = 0.555×(A3-A1)÷A2-A1)÷细菌或细胞数量
    1.11:是此法测得葡萄糖含量换算为糖原含量的常数,即111μg 糖原用蒽酮试剂显色相当于100μg 葡萄糖用蒽酮所试剂显示的颜色;C 标准:标准管浓度,0.1mg/mLV1:加入反应体系中糖原提取液体积,0.25mLV2:提取液体积,5mL Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样本鲜重,g;细菌或细胞数量:以104为单位,万个


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