多酚氧化酶(PPO)活性检测试剂盒

产品名称：多酚氧化酶测定试剂盒 （可见光分光光度法）
产品英文名：Polyphenol Oxidase (PPO) Assay Kit
产品货号：BC0190                          产地：北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼
产品规格：50管/24样                   产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            参考价格：520
库存状态：现货                          
关键字：多酚氧化酶测定试剂盒 

简要介绍：
PPO能够催化邻苯二酚产生醌，后者在525nm有特征光吸收。
PPO（EC1.10.3.1）主要存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是一种含铜的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化产生醌，从而引起褐化，与果蔬加工、茶叶品质和组培等密切相关。

产品详细描述

商品货号：	商品品牌：	规格	基本售价：	选择规格
BC0190-50管/24样	Solarbio	50管/24样	520.00元

产品简介： 
PPO 主要存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是一种含铜的氧化酶，能使一元酚和二元 酚氧化产生醌，从而引起褐化，与果蔬加工、茶叶品质和组培等密切相关。 PPO 能够催化邻苯二酚产生醌，后者在 410nm 有特征光吸收。

试验中所需的仪器和试剂： 
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

产品内容： 
提取液：液体，60ml×1 瓶，4℃保存，用前混匀；  
试剂一：液体，40ml×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体，10ml×1 瓶，4℃保存；

操作步骤：  
一、粗酶液提取：    
1. 收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每 200 万细菌或细胞加入 400μl 提取液，超 声波破碎细菌或细胞（功率 20％，超声 3 秒，间隔 10 秒，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10 分钟， 取上清，置冰上待测。
2. 称取约 0.2g 组织，加入 1ml 提取液进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10 分钟，取上清，置冰上待 测。

二、测定操作表：

冷却后，5000g，常温离心 10min，收集上清，用蒸馏水调零，410nm 处检测测定管和对照管吸光度。
注意:每个测定管需要设置一个对照管,可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液,然后集中进 行 1min 沸水浴处理

PPO活性计算：  
1、组织中 PPO 活力的计算:
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每分钟每 mg 组织蛋白在每 ml 反应体系中使 410nm 处吸光值变化 0.01 定义为一个酶活力单位。
PPO（U/mg prot）= V 反总×V 样总÷V 样÷T÷0.01×（A 测定-A 对照）÷Cpr=60×（A 测定-A 对照）÷Cpr
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每分钟每 g 组织蛋白在每 ml 反应体系中使 410nm 处吸光值变化 0.01 定义为一个酶活 力单位。
PPO（U/g 鲜重）= V 反总×V 样总÷V 样÷T÷0.01×（A 测定-A 对照）÷W=60×（A 测定-A 对照）÷W
2、细菌或培养细胞中 PPO 活力的计算:
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每分钟每 mg 组织蛋白在每 ml 反应体系中使 410nm 处吸光值变化 0.01 定义为一个酶 活力单位。
PPO（U/mg prot）= V 反总×V 样总÷V 样÷T÷0.01×（A 测定-A 对照）÷Cpr=60×（A 测定-A 对照）÷Cpr
（2）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每分钟每 1 万个细菌或细胞在每 ml 反应体系中使 410nm 处吸光值变化 0.01 定义为一 个酶活力单位。
PPO（U/104 cell）= V 反总×V 样总÷V 样÷T÷0.01×（A 测定-A 对照）÷细菌或细胞密度（104/mL） =60× （A 测定-A 对照）÷细菌或细胞密度（104/mL） =60× （A 测定-A 对照）÷细菌或细胞密度（104/mL）
 V 反总：反应体系总体积，0.9mL；V 样：加入反应体系中样本体积，0.15 mL；V 样总：加入提取 液体积，1 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，0.2g.

注意事项：
不同样本的多酚氧化酶的反应温度略有差别，可在 25-37℃之间进行调节。

相关文献：
《Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)》 作者:Beibei Li，Yang Ding，Xiuli Tang，Guoyi Wang，Shujuan Wu，Xianxian Li，Xiaofei Huang，Tongtong Qu，Jifeng Chen 期刊:Food and Bioprocess Technology 影响因子:3.032 PMID:
《MTA1 promotes the invasion and migration of pancreatic cancer cells potentially through the HIF-α/VEGF pathway》 作者:B Li, Y Ding, X Tang, G Wang, S Wu, X Li 期刊:Journal of Receptor and Signal Transduction Research. 影响因子:2.998 PMID:30396299

多酚氧化酶(PPO)活性检测试剂盒