产品名称:谷草转氨酶(GOT)活性检测试剂盒

产品英文名: Glutamic-oxalacetic Transaminase（GOT）Assay Kit

产品货号：BC1560               产地：北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格：50管/24样            产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            参考价格：130
库存状态：现货                          
关键字: ：  谷草转氨酶检测试剂盒|GOT检测试剂盒|谷草转氨酶|试剂盒

简要介绍：
GOT（ 2.6.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化可逆转氨基反应，是氨基酸代谢的重要酶。此外，GOT 在心肌细胞中含量高，临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。
    GOT 催化 α-同戊二酸和天门冬氨酸发生转氨基反应，生成谷氨酸和草酰乙酸，草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙tong酸；丙tong酸可与2,4-二硝基ben肼反应生成2,4-二硝基ben腙，在碱性条件下显棕红色；测定505nm 吸光度的变化，即可计算GOT 酶活力。

产品详细描述
产品内容：
提取液：液体30mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体8 mL×1瓶， 4℃保存；
试剂二：液体8mL×1瓶， 4℃保存；
试剂三：液体80 mL×1瓶，4℃保存；
标准品：液体1mL×1支，20μmol/mL丙tong酸钠标准品，4℃保存。
产品说明：
GOT（ 2.6.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化可逆转氨基反应，是氨基酸代谢的重要酶。此外，GOT在心肌细胞中含量高，临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。
GOT催化 α-酮戊二酸和天门冬氨酸发生转氨基反应，生成谷氨酸和草酰乙酸，草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙tong酸；丙tong酸可与2,4-二硝基ben肼反应生成2,4-二硝基ben腙，在碱性条件下显棕红色；测定505nm吸光度的变化，即可计算GOT酶活力。
实验需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样品测定的准备 
1、 细胞或微生物样品的制备 ：
先收集细胞或微生物样品到离心管内，弃上清，按照每500万细胞或微生物加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次）。3500g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：
称取约0.1g组织，加入1mL提取液进冰浴行匀浆。3500g  4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
二、测定操作表

1. 分光光度计预热30min以上，调节波长505nm，蒸馏水调零。
2. 标准曲线的测定

先将标准品稀释20μmol/mL，按下表 混合标准品和试剂一得到相应浓度标准管：

3、在EP管中加入下列试剂

混匀后，37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）预热30min

混匀后，37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）准确水浴20min

混匀，室温放置10min，在505nm波长处，测各管吸光度。
注：0μmol/mL 标准管为空白管。
三、计算

1. 标准曲线的绘制：

以各标准溶液浓度为x轴，以∆A（A标准管-A空白管）为y轴做标准曲线，得到方程y=kχ+b。将（A测定管-A对照管）带入方程求x值。

1. GOT活性计算：

（1）按样本鲜重计算：
单位定义：每小时每g鲜重样品催化产生1μmol丙tong酸的量为一个GOT活力单位。
GOT（U/g鲜重）=x×（V样本+V试剂一）÷（W×V样本÷V样总）÷T=12x÷W。
（2）按样本蛋白浓度计算：
单位定义：每小时每mg组织蛋白催化产生1μmol丙tong酸的量为一个GOT活力单位。
GOT（U/mg prot）=x×（V样本+V试剂一）÷（Cpr×V样本）÷T=12x÷Cpr。
（3）按血清体积计算：
单位定义：每小时每mL血清样品催化产生1μmol丙tong酸的量为一个GOT活力单位。
GOT（U/mL）=x×（V样本+V试剂一）÷V样本÷T=12x。
（4）按细胞数量计算：
单位定义：每小时每10⁴个细胞样品催化产生1μmol丙tong酸的量为一个GOT活力单位。
GOT（U/10⁴ cell）=x×（V样本+V试剂一）÷（V样本÷V样总×500）÷T=0.024x。
V样本：吸取样本体积，0.02mL；V试剂一：吸取试剂一体积，0.1mL；V样总：吸取提取液体积，1mL；W：样本鲜重，g；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；T：反应时间，0.5h；500：细胞个数，以万计。

相关文献：
《Hydroxychloroquine induced lung cancer suppression by enhancing chemo-sensitization and promoting the transition of M2-TAMs to M1-like macrophages》 作者:Yong Li, Fengjun Cao, Mingxing Li, Pindong Li, Yuandong Yu, Longchao Xiang, Tao Xu, Jinhua Lei, Yun Yan Tai, Jianyong Zhu, Bingbing Yang, Yingpin Jiang, Xiufang Zhang, Long Duo, Ping Chen & Xiongjie Yu  期刊:Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 影响因子:5.646 PMID:30373678

谷草转氨酶(GOT)活性检测试剂盒