多聚半乳糖醛酸酶(PG)检测试剂盒

多聚半乳糖醛酸酶（PG）活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
货号: BC2660
规格:50T/24S

产品简介：
多聚半乳糖醛酸酶（Ploygalacturonase, PG）属果胶酶的一种，广泛存在于植物、细菌及真菌中。其催化多聚半乳糖醛酸分解，在果实软化、花粉授粉、种子发育成熟及器官脱落等方面具有重要作用，并且病原菌在侵染宿主植物时，可分泌多聚半乳糖醛酸酶来降解宿主细胞壁，进而导致病程发展。
PG 解多聚半乳糖醛酸生成半乳糖醛酸，半乳糖醛酸与 DNS 试剂反应生成在 540 nm 有特征吸收峰的棕红色物质，测定 540 nm 处吸光值变化可计算得果胶酶活性。

试验中所需的仪器和试剂：
可见分光光度计、低温台式离心机、水浴锅、1 mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

产品内容：
提取液：液体 30 mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 8 mL×1 瓶，4℃保存。若溶液中有晶体析出，37℃水浴溶解。
试剂二：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加入 8 mL 蒸馏水，60℃水浴助溶。
试剂三：液体 20 mL×1 瓶，4℃避光保存。
标准品：粉剂×1 支，10 mg 半乳糖醛酸，4℃保存。临用前加入 0.943 mL 蒸馏水，配成 50 μmol/mL的标准液。

操作步骤：

一、粗酶液提取：
组织：按照质量（g）: 蒸馏水体积(mL)为 1 : 5~10 的比例（建议称取约 0.1 g，加入 1 mL 提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于 4℃，16000 g，离心 10 min，取上清置于冰上待测。
细菌：先收集细菌到离心管内，离心后弃上清；按照细菌数量（104个）：提取液体积（mL）为 500~1000︰1 的比例（建议 500 万个细菌加入 1 mL 提取液），冰浴超声波破碎细菌（功率 20%或 200 W，超声 3 s，间隔 7 s，总时间 5 min）；然后 4℃，16000 g，离心 10 min 取上清置于冰上待测。
液体：直接检测或用提取液稀释后检测。

二、测定步骤：
1、 分光光度计预热 30 min 以上，调节波长 540 nm，蒸馏水调零。
2、 将 50 μmol/mL 标准液稀释为 10、6、4、3、2、1.5、1.2 μmol/mL 的标准溶液备用。
3、 操作表：(在 1.5mL 离心管中)

相关文献：

《Functional analysis of the exocyst subunit BcExo70 in Botrytis cinerea》 作者:Wenqing GuanJuan FengRongxia WangZhiwei MaWeixia WangEmail authorKun WangEmail authorTingheng Zhu 期刊:Current Genetics 影响因子:3.464 PMID:31183512
 

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