产品名称:：  乙酰胆碱酯酶(AchE)活性检测试剂盒

产品英文名:  Acetylcholinesterase(AchE) Assay Kit

产品货号：BC2020              产地：北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格：50管/24样            产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            参考价格：180
库存状态：现货                          
关键字:  乙酰胆碱酯酶检测试剂盒|AchE检测试剂盒|乙酰胆碱酯酶|试剂盒

简要介绍：
AchE是一种丝氨酸水解酶，广泛存在于各种动物组织和血清中。在神经突触间隙中AchE通过催化水解神经递质乙酰胆碱（Ach）来维持神经冲动的正常传递，在生物神经传导中起重要作用。
    AchE催化Ach生成胆碱，胆碱与二硫对硝基ben甲酸（DTNB）作用生成5-巯基-硝基ben甲酸（TNB），TNB在412nm处有吸收峰，通过测定TNB的生成量，即可计算出AchE的活性。

产品详细描述
产品内容：
提取液：液体25mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体55mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入5.2mL试剂一，充分震荡溶解。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入5.2mL试剂一，充分震荡溶解。
试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入5mL蒸馏水溶解备用。
产品说明：
乙酰胆碱酯酶（AchE）属于丝氨酸水解酶，广泛存在于各种动物组织和血清中。AchE催化乙酰胆碱（Ach）水解，在神经传导调节中起重要作用。
AchE催化Ach水解生成胆碱，胆碱与二硫对硝基ben甲酸（DTNB）作用生成5-巯基-硝基ben甲酸（TNB）；TNB在412nm处有吸收峰，通过测定412 nm吸光度增加速率，计算AchE活性。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿，研钵/匀浆器，蒸馏水。
操作步骤：

• 粗酶液提取：
• 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，8000g 4℃离心10min，取上清液待测。
• 细菌、真菌：按照细胞数量（10⁴个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
• 血清等液体：直接测定。
• 测定操作：
• 可见分光光度计预热30 min，调节波长到412 nm，蒸馏水调零。
• 操作表：

• AchE活性计算公式：
• 组织AchE活性
• 按照蛋白浓度计算

活性单位定义：每毫克蛋白每分钟催化产生1nmol TNB为1个酶活单位。
AchE酶活(U/mg prot)= [ΔA÷ε÷d×V显色×10⁹] ÷（Cpr ×V样×V上清÷V酶促）÷T
                   = 2255×ΔA ÷Cpr。

1. 按照样本质量计算

活性单位定义：每克组织每分钟催化产生1nmol TNB为1个酶活单位。
AchE酶活(U/g鲜重)= [ΔA÷ε÷d×V显色×10⁹]÷（W ×V样÷V样总×V上清÷V酶促）÷T
                  = 2255×ΔA÷W。

1. 细菌、细胞AchE活性

活性单位定义：每10⁴个细胞每分钟催化产生1nmol TNB为1个酶活单位。
AchE酶活(U/10⁴ cell)= [ΔA÷ε÷d×V显色×10⁹]÷（细胞数量×V样÷V样总×V上清÷V酶促）÷T
= 2255×ΔA÷细胞数量

1. 血清AchE活性

活性单位定义：每毫升血清每分钟催化产生1nmol TNB为1个酶活单位。
AchE酶活(U/mL)= [ΔA÷ε÷d×V显色×10⁹]÷（V样×V上清÷V酶促）÷T =2255×ΔA
ε：TNB摩尔消光系数，13.6×10³ L/mol/cm；V显色：显色反应体系总体积（L），1 mL=0.001 L；10⁹：1mol=1×10⁹nmol；V酶促：酶促反应总体积，0.23mL；V上清：吸取上清液体积，0.05mL；V样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；V样：加入样本体积（mL），0.03 mL；T：反应时间，5min；细胞数量：提取时的细胞数量，万个。
注意事项：
1.测定过程中样本和工作液在冰上放置，以免变性和失活。
2.当吸光值大于1时，建议将样本稀释后测定。

相关文献：
《Chronic toxicity and biochemical response of Apis cerana cerana (Hymenoptera: Apidae) exposed to acetamiprid and propiconazole alone or combined》 作者:Wensu Han，Yemeng Yang，Jinglin Gao，Dongxiang Zhao，Chengcai Ren，Shijie Wang，Shan ZhaoYihai Zhong 期刊:Ecotoxicology 影响因子:2.46 PMID:30874992
《Neuroprotective effects of cordycepin inhibit Aβ-induced apoptosis in hippocampal neurons》 作者:Hao Song,Li-Ping Huang,Yuping Li,Chao Liu,Songhua Wang,Wei Meng,Shanshan Wei,Xin-Ping Liu,Yanchun Gong,Li-Hua Yao 期刊:NeuroToxicology 影响因子:3.263 PMID:30031108
《Effects of Phytase Transgenic Maize on the Physiological and Biochemical Responses and the Gut Microflora Functional Diversity of Ostrinia furnacalis》 作者:Xiao Hui Xu, Yinghui Guo, Hongwei Sun, Fan Li, Shuke Yang, Rui Gao & Xingbo Lu  期刊:Scientific Reports 影响因子:4.011 PMID:29535326

 

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