神奇滤布Miracloth是一种孔径为22-25微米的聚酯人造纤维滤布,除了可以用于分离原生质体、细胞匀浆 过滤、核酸纯化等等,还有一些有趣的用途.
基因工程转化真菌和一些土壤细菌时,往往需要先消化掉厚厚的细胞壁,制备分离原生质体以便进行转化, 即使是大家很熟悉的酵母转化,当简便的醋酸锂方法不起作用时,原始也是有效方法还是原生质体转 化.当经过消化处理的菌体混合液经过Miracloth过滤后,就可以去掉未被消化*的菌体和杂质,分离得 到的"裸露的"原生质体就可以准备进行转化或者电转了.如果没有这一步的分离,未*消化的菌体由于 生长迅速,会严重干扰结果.
植物基因组纯化相对比较麻烦一点,市面上有不少试剂盒可供选择,多数纯化基因组DNA的试剂盒采用快速 离心方法,其纯化产物大小仅为50kb左右.你可能没有想到,一种改良的
神奇滤布Miracloth 快速纯化方 法是另一种经济有效的选择:通过液氮研磨得到的组织经过裂解液处理,温浴、醋酸钾冰浴复性,用神奇滤 布Miracloth 过滤,得到的滤液可以直接用异丙醇沉淀.这个方法改良于玉米基因组纯化,特别适合各种植 物组织DNA的纯化.大的优点是快速经济实用,不需要昂贵的试剂盒或者试剂,整个方法就像用试剂盒一 样简单.
如果需要植物组织的高分子量基因组就不宜采用试剂盒. 神奇滤布Miracloth 是另外一个好选择--植物 组织匀浆后直接用Miracloth过滤就可以得到含有细胞核的溶液,离心沉淀细胞核,后继的高分子量基因组 抽提就简单易行了.此外,这个方法还可以用于制备研究转录因子所用的细胞核抽提物(Nucleic Extract),甚分离纯化线粒体DNA、细胞膜等等.
其实
神奇滤布Miracloth 就是简单的一种微孔滤膜,比干酪布好用得多.只要你想得到,就有比产品说明书 更广泛而有趣的用途.比如有人用在植物真菌培养,甚还有人用在抗体细胞培养中.聪明的你是不是也能 想到其他用途?只要有创意,这不起眼的小东西一样可以在实验室中发挥重要作用哟.
