1.理化特性 异构体多(达80多种)、耐热、煮沸不能去除、可被紫外线光解、易在体内富集、对肝有特殊的亲和力.
2.机制 (1)抑制磷酸酶 特一性抑制PP1和PP2A ① 使细胞发生凋亡样变化 因:磷酸化与去磷酸化之间调节失衡,使蛋白过度磷酸化,引起细胞骨架损伤. 表现为:细胞膜疱、细胞萎缩、细胞内细胞器重排,核染色质浓缩等. ② 可解抑制细胞增殖 使肿瘤细胞生长. (2)引起脂质过氧化 破坏细胞膜的结构与功能. 渥曼青霉素
(3)引起基因过度表达 与致癌有关.
3.中毒特点: (1)肝脏毒性 (2)肾脏毒性 (3)遗传毒性和促癌性① MCYST可明显提高SHE细胞微核率的形成,并呈剂量-反应关系. ② 不仅具有促癌性还具有致癌性
(4)胚胎及发育毒性 与胚胎死亡率发育畸形率呈剂量-反应关系. (5)其他毒性 ① 抑制免疫功能 ② 损伤神经系统 ③ 影响心功能
Wortmannin的具体使用浓度请参考相关文献,并根据自身实验条件(如实验目的,细胞种类,培养特性等)进行摸索和优化.
应用实例(仅作参考):
1)为检测wortmannin对PI3激酶和PLK1的抑制作用,先用不同浓度的wortmannin(0.25-50nM)预处理可溶的Jurkat片段10min,然后用AX7503(50nM)处理60min,发现wortmannin抑制PI3激酶和PLK1的IC50值分别为5.8nM和2.1nM.为检测wortmannin在体内对PLK1的抑制作用,先用10μM nocodazole(抗肿瘤药)处理Jurkat细胞15h(G2/M期阻滞),再用不同浓度的wortmannin(5,25,100,500nM)处理完整细胞30min(对照组用DMSO),发现PI3激酶和PLK1的活性都有降低,但是wortmannin对PI3激酶的抑制作用更.
2)为检测wortmannin对胰岛素代谢活性的作用,1μM wortmannin与不同浓度的胰岛素(0-100nM) 和1nM胰岛素与不同浓度的wortmannin(0-1μM)分别孵育大鼠脂肪细胞20min,胰岛素即使在高浓度(0.1μM)时其活性也可以被wortmannin抵消,而0.03μM wortmannin就可以抑制胰岛素水平,在0.1μM时可以*抑制胰岛素.为检测wortmannin对脂肪细胞中PI 3激酶活性的抑制作用,用不同浓度的wortmannin(0,1,10,100,1000nM) 进行处理,0.1μM wortmannin 可以*抑制PI-3激酶活性,wortmannin具有选择性,在相同浓度时不会抑制PI-4激酶.
用途及描述:生化试剂,生化实验研究,渥曼青霉素(Wortmannin)是有效的特异性的磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)抑制剂,IC50为2-4 nM.可抑制自噬体的形成,也有效抑制DNA-PK/ATM,IC50分别为16 nM 和150 nM.
Wortmannin通过对PI3-K/Akt信号传导途径的抑制,能够提高辐射或者去血清培养诱导的细胞凋亡效果,也能阻止细胞因子的抗细胞凋亡作用.渥曼青霉素对PI3-K的抑制作用也可以阻止由胰岛素受体活化引起的许多短期代谢效应.Wortmannin无明显的抗细菌作用,但具有很强的抑制真菌活性;
