色谱分析法出现至今已有不少年头,但仍然在分离分析领域占有十分重要的位置。不过色谱分析法(GC/HPLC)在应用上仍有一些局限性,例如应用于分析一些无紫外吸收、受压易分解变性的物质时,就需要一些辅助试剂或特殊色谱柱来解决难题了。衍生化方法是气相、液相色谱分析中十分常用的处理方法,它将不能分析的样品通过衍生化试剂反应转化为可分析的化合物。衍生化试剂也由此成为了色谱分析试验中经常被用到的试剂类型。今天就来详细的了解一下衍生化试剂吧!
什么是衍生化试剂?
衍生化是一种利用化学变换把化合物转化成类似化学结构物质的技术,常用的反应有酯化、酰化、烷基化、硅烷化、环化和离子化等。在色谱法应用衍生化技术,可以将不易被检测的样品与特定的衍生化试剂混合,生成稳定的便于量化和分离的衍生化物。
什么情况下需要使用衍生化试剂?
理想情况下,衍生化反应是一个反应迅速、定量进行、副产物极少或易于除去的化学反应。选择衍生化试剂的目的包括:
◆ 提高检测性能
◆ 改变分析物的分子结构或极性以获得出色的色谱分离效果
◆ 增加样品挥发性
◆ 稳定分析样品
如何选择合适的衍生化试剂?
对于衍生化试剂的选择,首先要考虑的是目标样品中是否存在可发生化学反应的一个或者多个合适的活性官能团,同时,还需要确定适合这类衍生化合物的检测机制。目前常见的两种衍生化类型是在目标样品中引入发色团或荧光官能团,然后分别采用紫外或荧光检测的方法进行测定。在选择衍生化试剂时一般需要考虑以下几点:
◆ 使用性质稳定的衍生化试剂
◆ 选择的衍生化试剂以及衍生过程中产生的副产物应为不可检测的、或者是易于与目标样品分离的
◆ 目标样品与衍生化试剂的反应条件易于实现
◆ 尽可能采用无毒的试剂
◆ 衍生化过程尽可能实现自动化
使用衍生化试剂的时候还需注意什么?
◆ 为了避免衍生化试剂失活,取用和保存的过程需要格外注意
◆ 要尽量在比较干燥的地方取用试剂,尽量缩短打开瓶盖的时间
◆ 衍生化反应要注意过量反应,反应不*会导致检测不充分
◆ 衍生化反应完成后应尽快进行色谱分析
什么情况下需要使用衍生化试剂?
理想情况下,衍生化反应是一个反应迅速、定量进行、副产物极少或易于除去的化学反应。选择衍生化试剂的目的包括:
◆ 提高检测性能
◆ 改变分析物的分子结构或极性以获得出色的色谱分离效果
◆ 增加样品挥发性
◆ 稳定分析样品
Solarbio的衍生化试剂
索莱宝公司整合资源,配以高效严谨的质检水平,重磅推出分析实验周边试剂第一弹——Solarbio衍生化试剂系列产品。
Solarbio衍生化试剂的优势:
◆ 纯度高:所有产品均具有较高纯度,无衍化副产品
◆ 适用范围广:针对电化学检测标记、紫外检测标记、荧光检测标记等应用均有对应的产品提供
◆ 产品种类丰富:满足色谱分析中绝大多数衍生化反应的需求
Solarbio衍生化试剂应用案例
案例一:
SV8010 L-缬氨酸的衍生化检测方法
衍生化试剂:12mg OPA(SDP7010)、0.1mL乙醇、0.9mL 0.1mol/L pH10.4硼酸钠缓冲液、10μL 3-MPA
进样程序:吸取L-缬氨酸(SV8010)标液1μL、OPA衍化试剂2μL、0.1mol/L pH10.4硼酸钠缓冲液2μL,混合5次,等待1min,进样。
阅读全文