SWBT-003A Western blot通用试剂盒(兔/小鼠)PVDF膜 使用说明书

本试剂盒针对一抗为兔/小鼠来源的Western blot实验使用。

注意事项:

1.本试剂盒仅用于科研，不能应用于临床。

2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

自备材料及试剂:

1.适合目的蛋白的凝胶板;

2.电泳仪，电转仪，抗体孵育及相关设备;

3.高精度可调移液器(已校准)及吸头;

4.兔/小鼠源一抗;

5.甲醇，双蒸水;

6.化学发光仪或相关仪器。溶液配制:

1.电泳工作液:取出包装袋中全部粉剂溶于400ml 的去离子水或蒸馏水中，定容至500ml,

即为5xTris-甘氨酸电泳缓冲;电泳前，将5xTris-甘氨酸电泳缓冲液稀释5倍后使用。

2.转膜工作液:每瓶10x电泳转移缓冲液(转膜液)100mL，加200mL无水甲醇，加入双

蒸水，定容至1000mL，工作液4°C预冷保存。

3.1xTBST缓冲液:取10xTBST缓冲液100mL，加入双蒸水，定容至1000mL，室温暂存。

封闭工作液:根据需求选择配制5%脱脂奶粉或5%BSA缓冲液(二选一)，取5g脱脂

奶粉/BSA，加入1xTBST缓冲液，定容至100mL，溶解完-全后暂存4°C。

4.检测含有生物素或使用生物素标记的抗体时封闭液不宜用脱脂奶粉，因为脱脂奶粉中含

有生物素，用BSA效果更好，磷酸化抗体检测应使用BSA进行封闭。