发布时间:2026/8/3
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二硫苏糖醇是一种还原蛋白质S-S键的试剂;生化研究用作巯基保护剂;酶的专一性抑制剂;测定酶活力。SDS-PAGE上样缓冲液的配制等。
二硫苏糖醇(Dithiothreitol,简称为DTT)是一种小分子有机还原剂,其还原状态下为线 性分子,被氧化后变为包含二硫键的六元环状结构。DTT是一种很强的还原剂,其还原性很 大程度上是由于其氧化状态六元环(含二硫键)的构象稳定性。
DTT 的用途之一是作为巯基化DNA的还原剂和去保护剂。巯基化DNA末端硫原子在溶 液中趋向于形成二聚体,特别是在存在氧气的情况下。这种二聚化大大降低了一些偶联反应 实验(如DNA在生物感应器中的固定)的效率;而在DNA溶液中加入DTT,反应一段时间 后除去,就可以降低DNA的二聚化。
DTT 也常常被用于蛋白质中二硫键的还原,可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成 的蛋白质分子内或分子间二硫键。但DTT往往无法还原包埋于蛋白质结构内部(溶剂不可及) 的二硫键,这类二硫键的还原常常需要先将蛋白质变性(高温加热或加入变性剂,如6M 盐 酸胍、8M 尿素或1%SDS)。反之,根据DTT存在情况下,二硫键还原速度的不同,可以 判断其包埋程度的深浅。
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