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胰蛋白酶消化液的作用用途及使用方法
胰蛋白酶消化液的作用用途及使用方法
  胰蛋白酶消化液 为蛋白酶的一种,EC 3.4.4.4,是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。在脊椎动物中,作为消化酶而起作用。在胰脏是作为酶的前体胰蛋白酶原而被合成的。作为胰液的成分而分泌,受肠激酶,或胰蛋白酶的限制分解成为活化胰蛋白酶,是肽链内切酶,它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切断。它不仅起消化酶的作用,而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体,起活化作用。是特异性强的蛋白酶,在决定蛋白质的氨基酸排列中,它成为*的工具。
  作用与用途
  胰蛋白酶消化液能选择地水解蛋白质中由赖氨酸或精氨酸的羧基所构成的肽链,能消化溶解变性蛋质,对未变性的蛋白质无作用,因此,能使脓、痰液、血凝块等分解、变稀,易于引流排除,加速创面净化,促进肉芽组织新生,此外还有抗炎症作用。
  临床上用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡、创伤性损伤、瘘管等所产生的局部水肿、血肿及脓肿等。喷雾吸入,用于呼吸道疾病。也可用于治疗毒蛇咬伤。还常用于动物细胞培养前对组织的处理。
  剂量与用法
  肌内注射,1 000~2 000U或5 000U用生理盐水或注射用水溶解,1次/日。治毒蛇咬伤,取本品2 000U,1~3支,加0.25%~0.5%盐酸普鲁卡因液(或注射用水)4ml~20ml溶解,以牙痕为中心,在伤口周围作浸润注射。或在肿胀部位上方作环形封闭1~2次,如病情需要可重复使用。
  副作用
  1、寒战、发热、头痛、头晕、胸痛及腹痛、腹泻等。
  2、不可用于急性炎症及出血空腔中。
  3、肝、肾损伤、血凝异常和有出血倾向者忌用。
  胰蛋白酶消化液使用方法:
  1. 贴壁细胞的消化:
  a) 吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
  b) 加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置1-2 分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴
  壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
  c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪
  吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接
  用于后续实验。
  d) 如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
  e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细
  胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g 离心1 分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清
  的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
  2. 组织的消化:
  不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

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