2015-08-18 索莱宝生物
1实验原理
细胞在变性剂的作用下被裂解，同时核蛋白体上的蛋白变性，核酸释放；释放出来的DNA和RNA由于在特定PH下溶解度的不同而分别位于整个体系中的水相和中间相，从而得以分离；有机溶剂抽提，沉淀，得到纯净DNA。
2试验方法
材料准备→破碎细胞，释放内容物→核酸分离、纯化→核酸的沉淀或吸附及杂质的去除→核酸溶解保存
1.试剂盒提取法
公司产品
D1500 植物基因组DNA提取试剂盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00
D1600 细菌基因组DNA提取试剂盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00
D1700 动物组织/细胞基因组DNA提取试剂盒 solarbio 50T/100T 盒400.00/700.00
D1800 全血基因组DNA提取试剂盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00
D1850 全血基因组DNA提取试剂系统 solarbio 50T/200T 盒 360.00/960.00
D1900 酵母基因组DNA提取试剂盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00
D2100 通用基因组DNA提取试剂盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00
D2300 真菌基因组DNA提取试剂盒 solarbio 50T/100T 盒 500.00/850.00
D2400 DNA病毒基因组提取试剂盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00
D2600 土壤基因组DNA提取试剂盒 solarbio 50T/100T 盒 680.00/1200.00
D2700 粪便基因组DNA提取试剂盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00
2.苯酚氯仿提取法
实验步骤
① 裂解液（SDS/异硫氰酸胍）、RNAse、蛋白酶K等55～65℃裂解细胞，使蛋白变性，释放核酸，加入KAc以提高盐浓度，使蛋白质、多糖等沉淀。
② 裂解*后加入一定体积的苯酚-氯仿，混匀后离心取上清；
③ 加入等体积氯仿-异戊醇，混匀后离心取上清水相；
④ 加入定量的异丙醇，使DNA沉淀，加入适量的核酸助沉剂或乙酸钠以增加核酸的获得率，离心除去上清；
⑤ 用70%的乙醇洗涤1～2次，加入适量氯化钠或氯化锂等去除多糖；(可用PEG代替乙醇，具有去多糖作用)
⑥ 待酒精挥发*后，用TE缓冲液溶解DNA，保存备用。
温馨提示：本公司出售以上实验中所用到的各种产品，有意者请！
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3常见问题
4注意事项
① 酚一定要碱平衡。苯酚具有高度腐蚀性，氯仿易燃、易爆、易挥发，具有神经毒作用，操作时应注意防护。
② 取各上清时,不应贪多,以防非核酸类成分干扰；
③ 乙醇洗涤后要充分晾干，以免影响后续反应；
④ 各操作步骤要轻柔,避免因机械损伤，造成DNA断裂；
⑤ 为了您的安全，实验室请带防护口罩和手套。
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