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【产品专区】DEPC水和DEPC处理水的区别

【产品专区】DEPC水和DEPC处理水的区别

 索莱宝生物

 

DEPC即二乙基焦碳酸酯(diethylprocarbonate),可灭活各种蛋白质,是RNA酶的强抑制剂。原位杂交在杂交及其以前的各步处理中,所有液体试剂都应经DEPC处理。 在做RNA提取实验时,实验器具要用“DEPC水"处理过,溶液一般都要用"DEPC处理水"来配制。

 

DEPC处理水

DEPC处理水即RNAase-free ddH2O, 配制方法是:取市售DEPC 1ml,加入1L待处理水(蒸馏水等)中(即终浓度含0.1% DEPC的水),经猛烈振摇后,于室温静止数小时,然后高压灭菌,以除去降解DEPC(DEPC分解为CO2和乙醇)。

 

注意:①DEPC是一种潜在的致癌物质,在操作中应尽量在通风的条件下进行,并避免接触皮肤。②含有Tris缓冲液的溶液中,不能加入DEPC

 

 

DEPC水

DEPC水是指终浓度含0.1% DEPC的水,在1000ml双蒸水中加入DEPC原液1ml,然后摇匀过ye

 

产品使用常见误区

误区1

重复使用含DEPC的水处理:

由于DEPC较贵,而且书上说DEPC要用高压灭菌处理去除,于是有些人就萌发了重复使用DEPC的想法,即对含有DEPC的水不进行高压灭菌,从而重复使用含DEPC的水处理枪头、离心管等。节约本是好事,但这样的节约是无效的。因为DEPC在水溶液中不稳定,极易分解,DEPCpH6.0pH7.0PBS缓冲液中的半衰期分别约为20min10minDEPC在水中的半衰期约为30min。因此,重复使用含DEPC的水不能保证实验的RNase-free

误区2

溶液中DEPC含量越高,灭活效果越好:

这个误区错了一半,的确1% DEPC能灭活高达1000ng/mlRNase A,而0.1% DEPC只能灭活少于500ng/mlRNase A。但是溶液中残留的DEPC副产物会抑制一些酶反应,因此DEPC含量越高,高压灭菌后的DEPC副产物就越多,抑制越明显。

误区3

必需长时间高压灭菌来*去除DEPC:

DEPC处理过的溶液,在15-20min的高压灭菌后还可以闻到一股特殊的香味,因此有人认为高压灭菌去除DEPC不*,所以要延长高压灭菌的时间以*去除DEPC。但是延长高压灭菌的时间并不需要,因为闻到的特殊香味不是DEPC的,而是DEPC分解产物之一的乙醇同溶液中残留的微量的羧酸(如甲酸和乙酸等)反应产生的挥发性脂类。这种特殊的水果香味不代表有痕量的DEPC残留。

 

北京索莱宝公司长期提供DEPC水和DEPC处理水两种产品,货号分别是D8210R1600.特别是DEPC处理水可以直接用于实验耗材的RNA酶的清除作用。

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