退火缓冲液(5×)说明书
货号:D2810
规格:1ml/5ml
保存:室温储存,有效期少12个月。
产品说明:
DNA 退火缓冲液(Annealing Buffer for DNA Oligos),即DNA 寡核苷酸退火缓冲液,该退火缓冲液不仅可以
用于常规的DNA Oligo 的退火,而且特别适合于较难退火的用于siRNA 质粒构建的DNA Oligo 的退火。使用
DNA 退火缓冲液(5×)可以有效避免DNA Oligo 自身形成发夹结构,并且两条Oligo 退火后可以直接和经酶
切纯化的质粒连接。通常转化后可以得到大量的阳性克隆。
使用本试剂操作非常简单,只需把待退火的DNA Oligo 和DNA 退火缓冲液(5×)按照一定比例混合后,
置于PCR 仪上,约60 分钟即可完成。
操作步骤:
1. 用去离子水将DNA 退火缓冲液(5×)稀释成1×工作浓度。
2. 用DNA 退火缓冲液(1×)分别溶解互补的两条DNA 寡核苷酸单链,使它们的摩尔浓度相等;
3. 取相同体积的步骤2 中得到的寡核苷酸单链溶液混合,置于PCR 反应管中,样品不要用矿物油覆盖。
4. 将PCR 反应管置于PCR 仪中,设置反应条件: 95℃变性2min;缓慢降温25℃,降温过程用时少
45min;产物可4℃短暂保存,用于后续实验。长期保存可于-20℃冻存。
注意事项:
1. DNA 退火缓冲液(5X) 只适合于DNA oligo 的退火,不能用于RNA oligo 的退火。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。