透析袋的处理
分子在半透膜间的分离是由膜两侧溶液的浓度差驱动的,受相对于膜内微孔尺寸的分子大小
(分子质量)的限制。 微孔尺寸决定着截留分子质量,截留分子质量的定义是当90%的溶质分子可
被膜截留时的分子质量。 实际某一溶质的通透性不仅取决于分子的大小,还取决于分子的形状、
分子的水化程度及其所带的电荷。 这些参数均受溶剂的性质、pH以及离子强度的影响。 因此截留
分子质量只能作为参考,而不能地用来预测在各种溶质和溶剂下的透析行为。 透析膜孔径范
围很大(从100Da到2000kDa). 在透析大多数质粒DNA和许多蛋白质时,截留分子质量在12000
'"'-14000Da之间比较适合。
(1)将透析管剪成适当的长度(10"'20cm) 的小段,即形成透析袋。
(2)在大体积的2% (m/ V)碳酸氢纳和lmmol/L EDTA(pH8. 0)中将透析袋煮沸10min。
(3)将透析袋用蒸馆水*漂洗。
(4)将透析袋置lmmol/L EDTA(pH8. 0)中煮沸10min.
(5)待透析袋冷却,存放于4
0
C,应确保透析袋始终浸没在液体中。
重要:从此步起用透析袋时一定要戴手套操作。
(6)在使用之前要用茶馆水将透析袋里外加以清洗。
【;主】
也可将透析袋放在广口瓶中充满水, 松动瓶盖, 于20psiCl.40kg/cm2)高压灭菌10mi n,代替第4步
用lmmol/L EDTA(pH8. 0)中煮沸10mi日的操作。