更新时间:2026-05-23
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样本量少,又想检测多个指标怎么办?相信不少在做ELISA检测的科研人员会遇到这个问题。那么小编今天就介绍一种只需要少量样本就能快速高效的检测多种指标的方法—多因子检测。
什么是多因子检测技术?小编先从普通的双抗体夹心ELISA检测说起。常用的双抗体夹心ELISA定量检测技术是将特异性抗体包被到固相的酶标板上,然后加入倍比稀释的标准品和预稀释的样本,标准品和样本中的待测抗原会与酶标板上包被抗体结合;再加上酶标的特异性检测抗体,形成包被抗体-抗原-检测抗体的三明治夹心结构,加入酶的底物显色并终止显色后,在仪器下读取OD值,根据比对标准品和样本的OD值,就能计算出样本中待测物质的含量。

对于某些样本含量比较低的指标,可以用生物素化的检测抗体,然后利用生物素和链霉亲和素的强亲和力,形成抗体-生物素-链酶亲和素-酶复合物,复合物再与底物反应显色,实现进一步的放大作用。

普通ELISA定量检测一个指标就需要样本量几微升到几十微升不等,如果获得样本量少还想要精确测量多个指标怎么办?小编就推荐大家了解一下今天的主角—多因子检测技术。
01检测原理
1红色和红外两种荧光染料包被微球,每种荧光有10种浓度,共10×10=100种不同比例荧光,提供了类似ELISA孔板的捕获表面。


2不同的特异性抗体偶联到不同颜色的微球上,每种颜色的微球指向一种特异的分析物,偶联好的微球混合后用于多重检测,捕捉待测物。

3当微球和样品溶液混合后,微球上包被的特异性抗体就与样品(血清、血浆、细胞培养液或组织裂解液)中相应的目标分析物结合,然后加入生物素标记的检测抗体会结合到目标分析物上,再加上荧光标记的链亲和霉素-藻红素(SA-PE),就会形成“三明治"夹心复合物。

4最后通过仪器对特异性目的蛋白进行检测。染色的微球在液流路中逐个循序通过,仪器中红色光源(635nm分类激光)测量微球内的染料,并识别微球编码和分析物种类,绿色光源(532nm报告激光)测量微球报告分子,即分析物浓度。

02检测流程

03检测技术的优势
(1) 显著降低样品的需要量,只需要12.5–50μL的样品;
(2) 单个样品,海量数据轻松拿,一次实验,同步检测多达100种靶标分子,消除传统方法的反复冻融;
(3) 3小时内完成实验,自动化数据处理,数据灵敏度高,重现性好,可比性好。
总之小编一句话,“用少量样本获得海量可靠数据,发高分文章,用它!用它!用它!"。
讲到这里,肯定有小伙伴要问“我想做多因子检测,但是没有仪器,没有平台怎么办?"。
小编就要告诉各位小伙伴了“多因子检测平台哪家有?中国北京找索莱宝"。
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