封闭用马血清的定义、处理工艺和作用机制
封闭用马血清是从健康马血液中分离、经严格工艺处理（灭活、除菌、去杂蛋白）制成的生物试剂，核心用途是在免疫检测实验中阻断非特异性结合，减少背景干扰，提高实验结果的特异性与准确性。其本质是不含目标抗体/抗原的天然蛋白混合物，通过占据实验载体（如硝酸纤维素膜、酶标板、组织切片）上的空白位点，避免检测抗体/抗原与载体非特异性结合，从而凸显特异性信号。
核心处理工艺与质量标准：
灭活处理：56℃水浴30分钟，破坏血清中的补体系统（避免补体参与免疫反应干扰结果）；
除菌纯化：经0.22μm滤膜过滤，去除细菌、真菌等微生物，确保无菌性；
去杂处理：部分产品会去除高丰度杂蛋白（如白蛋白聚合物），降低非特异性结合风险；
质量指标：蛋白浓度（通常5-10mg/mL）、无菌性、无支原体、内毒素含量低（＜10EU/mL）、无目标抗原/抗体交叉反应。
2.封闭用马血清的核心作用机制
免疫检测实验中（如WesternBlot、ELISA），载体表面（如酶标板）除了固定的目标抗原外，还存在大量空白位点。若不进行封闭，检测抗体（一抗/二抗）可能通过疏水作用、静电作用与这些空白位点结合，导致“假阳性”或高背景信号（如膜上出现非特异性条带、酶标板OD值偏高）。
封闭用马血清的作用机制：
占据空白位点：血清中的白蛋白、球蛋白等天然蛋白，通过非特异性结合覆盖载体表面的空白区域，形成“屏障”；
不干扰特异性结合：马血清中不含实验目标的抗原/抗体，不会与检测抗体、目标抗原发生特异性反应；
降低背景噪音：阻断检测抗体与载体的非特异性结合，使实验结果的“信号-背景比”显著提升，让特异性条带/信号更清晰。
更新时间：2025-12-12
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